【實驗原理】活細胞與死細胞在性質上有許多差別,特別是通透性的變化最為明顯。活細胞的原生質具有選擇透過性;而er死si細xi胞bao則ze為wei全quan透tou性xing。選xuan擇ze透tou過guo性xing是shi質zhi壁bi分fen離li的de先xian決jue條tiao件jian。因yin此ci能neng發fa生sheng質zhi壁bi分fen離li的de細xi胞bao就jiu表biao示shi是shi活huo的de,不bu能neng發fa生sheng質zhi壁bi分fen離li的de細xi胞bao則ze說shuo明ming是shi死si的de。
死活細胞間不僅通透性不同,而 pH 值等情況也不同,它們對某些染料的反應明顯不同。某些染料能在活細胞的細胞液中積累,但不能染活的原生質;另一方麵,這些染料可使死細胞的原生質染色,但不積累於液泡。所以可根據某些染料活體染色的情況來鑒定細胞死活。
【實驗材料和用具】 洋蔥及其它植物材料、酒精燈、顯微鏡、刀片、鑷子、載玻片、蓋玻片、 1M 蔗糖、 0.01% 中性紅溶液等。
【實驗步驟】
1 、用質壁分離的方法鑒定細胞的死活。
撕洋蔥表皮細胞滴加 IM 蔗糖中,在顯微鏡下觀察。細胞很快發生質壁分離,這就是細胞活著的證據。另把製取的同樣製片,用冷凍、加熱、幹燥、酒精浸泡等方法將它們的細胞殺死,然後取代上述活材料,做質壁分離實驗,結果看到已死的細胞不能發生質壁分離現象。
用尿素、硝酸鉀、氯化鈣溶液等來代替蔗糖,能快速鑒定細胞的死活。
2 、用活體染色的方法的鑒定細胞的死活。
取洋蔥或其它材料,用鑷子撕下表皮(如表皮不易撕下,也可在水中用鋒利的刀片輕輕刮去多餘部分),或用刀片做成切片若幹,將表皮或切片浸入中性紅溶液中,放置 5-10 分鍾最出用清水浸洗後置於載玻片上,加蓋玻片,在顯微鏡下觀察。
活(huo)細(xi)胞(bao)一(yi)般(ban)在(zai)液(ye)泡(pao)內(nei)染(ran)成(cheng)紅(hong)色(se)至(zhi)紫(zi)色(se),原(yuan)生(sheng)質(zhi)不(bu)染(ran)色(se),死(si)細(xi)胞(bao)常(chang)呈(cheng)橙(cheng)紅(hong)色(se),原(yuan)生(sheng)質(zhi)和(he)細(xi)胞(bao)核(he)被(bei)染(ran)色(se)。撕(si)破(po)的(de)細(xi)胞(bao),隻(zhi)剩(sheng)細(xi)胞(bao)壁(bi)時(shi),呈(cheng)淡(dan)紅(hong)色(se)或(huo)淡(dan)紫(zi)色(se)。
為進一步鑒別細胞的死活,可把玻片上的水溶液吸去,滴一滴 1M 蔗糖溶液,便可觀察到活細胞能發生質壁分離,死細胞及空細胞都有沒有這種現象。
可用加熱、冷凍或其它方法殺死植物組織,然後用上麵所述方法進行處理,比較與活組織有何不同。
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