鞭毛是細菌的運動“器官”，一般細菌的鞭毛都非常纖細，其直徑為0.01—0.02μm，在zai普pu通tong光guang學xue顯xian微wei鏡jing的de分fen辨bian力li限xian度du以yi外wai，故gu需xu要yao用yong特te殊shu的de鞭bian毛mao染ran色se法fa
，才cai能neng看kan到dao。鞭bian毛mao染ran色se是shi借jie媒mei染ran劑ji和he染ran色se劑ji的de沉chen澱dian作zuo用yong，使shi染ran料liao堆dui積ji在zai鞭bian毛mao上shang，以yi加jia粗cu鞭bian毛mao的de直zhi徑jing，同tong時shi使shi鞭bian毛mao著zhe色se
，在zai普pu通tong光guang學xue顯xian微wei鏡jing下xia能neng夠gou看kan到dao。

    zaixianweijingxiaguanchaxijundeyundongxing，yekeyichubupanduanxijunshifouyoubianmao。tongchangshiyongyadifahuoxuandifaguanchaxijundeyundongxing。guanchashi，yaoshidangjianruoguangxian
，zengjiafancha，ruguoguangxianhenqiang，xijunhezhouweideyetijiunanyibianbie。

主要試劑

    鞭毛染色液，萬分之一的美藍水溶液，凡士林，無菌水。

主要設備

載玻片，凹玻片，蓋玻片，酒精燈，顯微鏡等

實驗材料

蘇雲金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis），假單胞菌（Pseudomonas sp．），金黃色葡萄球菌。

實驗步驟

1．鞭毛染色

   1) 菌種用新培養的菌種為宜
，如所用菌種已長期未移種，則用新製備的斜麵連續移種2—3次後再使用。最好是將經活化的菌種接種到新製備的瓊脂斜麵或半固體培養基平皿上，培養10小時左右
，備用。

   2) 製(zhi)片(pian)在(zai)載(zai)玻(bo)片(pian)的(de)一(yi)端(duan)滴(di)一(yi)滴(di)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)
，用(yong)接(jie)種(zhong)環(huan)挑(tiao)取(qu)少(shao)許(xu)備(bei)用(yong)的(de)菌(jun)苔(tai)
，最(zui)好(hao)從(cong)菌(jun)落(luo)的(de)邊(bian)緣(yuan)取(qu)菌(jun)苔(tai)，注(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)挑(tiao)上(shang)培(pei)養(yang)基(ji)，在(zai)載(zai)玻(bo)片(pian)的(de)水(shui)滴(di)中(zhong)輕(qing)沾(zhan)幾(ji)下(xia)。將(jiang)載(zai)玻(bo)片(pian)稍(shao)傾(qing)斜(xie)
，使(shi)菌(jun)液(ye)隨(sui)水(shui)滴(di)緩(huan)慢(man)流(liu)到(dao)另(ling)一(yi)端(duan)，然(ran)後(hou)平(ping)放(fang)在(zai)空(kong)氣(qi)中(zhong)幹(gan)燥(zao)。

   3) 染色塗片幹燥後滴加A液染3—5分鍾
，用蒸餾水衝洗，或將殘水瀝幹或用B液衝去殘水（注意：一定要充分洗淨A液後再加B液

，否則背景很髒）。洗淨A液滴加B液後，將玻片在酒精燈上稍加熱，使其微冒蒸汽且不幹
，一般染30—60秒鍾。然後用蒸餾水衝洗，自然幹燥。

   4) 鏡檢鏡檢時，如未見鞭毛
，應在整個塗片上多找幾個視野，有時隻在部分塗片上染出鞭毛。菌體為深褐色
，鞭毛為褐色。

細菌鞭毛染色要求非常小心細致
，染色成功的關鍵主要決定於：

      a. 菌種活化的情況，即要連續移種幾次；

      b. 菌齡要合適，一般在幼齡時鞭毛情況最好
，易於染色；

      c. 新鮮的染色液；

      d. 載玻片要求幹淨無油汙。

鞭毛染色所用載玻片的清洗方法如下：

    xuanzeguanghuawushanghendebopian。xianyongxiyifenzhufei，xiyifenzuihaozaixibopianqianjiazhengliushuizhufei，yonglvzhiguolvquzha。weilebimianbopianbicimosun

，zuihaobazaibopianfangzaitezhidejiashangzhu，zhubishaolengquehouquchu
，yongqingshuixijing，zaifangrunongxiyezhongjinpao24小時左右
，取出用清水衝洗殘酸，最後用蒸餾水洗淨，瀝幹水並放於95％乙醇中脫水，取出玻片，用火焰燒去酒精
，立即使用。如不立刻使用，可存放於幹淨的盒中或50％乙醇中短期存放。由於空氣中常常漂浮油汙
，最好立即使用。在洗淨的玻片上滴上水滴後應能均勻散開。

2．運動性觀察

   1) 壓滴法

      a. 分別將5ml無菌水倒入蘇雲金芽孢杆菌、假單胞菌和金黃色葡萄球菌的斜麵培養物內，製成菌懸液。各取出1ml菌液稀釋至肉眼看不到混濁為止。

      b. 各取2—3環三種稀釋菌液，分別放在三片清潔的載玻片中央

，再各放一環萬分之一的美藍水溶液混勻。

      c. 用(yong)鑷(nie)子(zi)夾(jia)一(yi)潔(jie)淨(jing)的(de)蓋(gai)玻(bo)片(pian)，使(shi)其(qi)一(yi)邊(bian)先(xian)接(jie)觸(chu)菌(jun)液(ye)，然(ran)後(hou)將(jiang)整(zheng)個(ge)蓋(gai)玻(bo)片(pian)慢(man)慢(man)放(fang)下(xia)，注(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)產(chan)生(sheng)氣(qi)泡(pao)。按(an)此(ci)法(fa)分(fen)別(bie)將(jiang)蓋(gai)玻(bo)片(pian)覆(fu)蓋(gai)於(yu)三(san)種(zhong)菌(jun)液(ye)上(shang)。

      d. 先以低倍鏡找到標本，再用高倍鏡觀察，觀察時光線要調得暗些。

   2) 懸滴法

      a. 在潔淨蓋玻片周圍塗少許凡士林。

      b. 在蓋玻片中央滴一小滴菌液
，或用接種環取1—2環菌液置於中央。

      c. 將(jiang)凹(ao)玻(bo)片(pian)反(fan)轉(zhuan)，使(shi)凹(ao)窩(wo)中(zhong)心(xin)對(dui)準(zhun)蓋(gai)玻(bo)片(pian)上(shang)的(de)菌(jun)液(ye)滴(di)，液(ye)滴(di)不(bu)得(de)與(yu)凹(ao)玻(bo)片(pian)接(jie)觸(chu)，以(yi)接(jie)種(zhong)環(huan)柄(bing)輕(qing)壓(ya)使(shi)蓋(gai)玻(bo)片(pian)與(yu)凹(ao)玻(bo)片(pian)粘(zhan)在(zai)一(yi)起(qi)，液(ye)滴(di)處(chu)於(yu)封(feng)閉(bi)的(de)小(xiao)室(shi)中(zhong)，防(fang)止(zhi)液(ye)滴(di)幹(gan)燥(zao)和(he)氣(qi)流(liu)的(de)影(ying)響(xiang)。

      d. 小心將凹玻片翻轉過來，使菌滴仍懸浮在蓋玻片下和凹窩中心（圖Ⅳ-3）。

      e. 先用低倍鏡找到懸滴邊緣
，再用高倍鏡觀察。觀察時光線要調得暗一些。

    用懸滴法分別觀察蘇雲金芽孢杆菌、假jia單dan胞bao菌jun和he金jin黃huang色se葡pu萄tao球qiu菌jun的de運yun動dong性xing。細xi菌jun的de運yun動dong有you一yi定ding的de前qian進jin方fang向xiang
，並bing可ke轉zhuan彎wan
，極ji生sheng單dan鞭bian毛mao菌jun類lei多duo為wei直zhi線xian運yun動dong

，周zhou生sheng鞭bian毛mao菌jun類lei多duo作zuo波bo浪lang式shi運yun動dong。