微載體培養技術(micro-carrier culture technique)於1967年被用於動物細胞大規模培養。經過三十餘年的發展,該技術日趨完善和成熟,廣泛應用於生產疫苗、基ji因yin工gong程cheng產chan品pin等deng。微wei載zai體ti培pei養yang是shi目mu前qian公gong認ren最zui具ju發fa展zhan前qian途tu的de一yi種zhong動dong物wu細xi胞bao大da規gui模mo培pei養yang技ji術shu,其qi兼jian具ju懸xuan浮fu培pei養yang和he貼tie壁bi培pei養yang的de優you點dian,且qie容rong易yi放fang大da。該gai技ji術shu已yi廣guang泛fan用yong於yu培pei養yang各ge類lei型xing細xi胞bao,如ru293細胞、成肌細胞、Vero細胞、CHO細胞。
一、 微載體
微載體是指直徑60-250 μm,能適用於貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。常用商品化微載體有三種:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。
二、微載體培養原理與操作
qiyuanlishijiangduixibaowuhaideweizaitikelijiarupeiyangrongqidepeiyangyezhong,zuoweizaiti,shixibaozaiweizaitibiaomianfuzheshengchang,tongshitongguochixujiaodongshiweizaitishizhongbaochixuanfuzhuangtai。
貼壁依賴性細胞在微載體表麵上的增殖,要經曆黏附貼壁、生sheng長chang和he擴kuo增zeng三san個ge階jie段duan。細xi胞bao隻zhi有you貼tie附fu在zai固gu體ti基ji質zhi表biao麵mian才cai能neng增zeng殖zhi,因yin此ci細xi胞bao在zai微wei載zai體ti表biao麵mian的de貼tie附fu是shi進jin一yi步bu鋪pu展zhan和he生sheng長chang的de關guan鍵jian。細xi胞bao主zhu要yao通tong過guo靜jing電dian引yin力li和he範fan德de華hua力li與yu微wei載zai體ti黏nian附fu,這zhe取qu決jue於yu細xi胞bao與yu微wei載zai體ti的de接jie觸chu概gai率lv和he相xiang融rong性xing。
youyudongwuxibaowuxibaobi,duijianqielimingan,yinciweizaitipeiyangzaicaozuozhongduijiaobanzhuansujijiaobanfangshideyaoqiudoushifenyange。weizaitipeiyangyaoqiujiaobandesudufeichangman,zuidasudu75 r/min。細胞微載體培養通常分為三個時期:tiebiqi,guoduqihepeiyangqi。tiebiqiheguoduqikeyishiyongchaodisuxibaocilijiaobanxitongjinxingpeiyang,gaixitongjuyouchaodidejiaobansudu,jianqielixiaoqienengzaidisuxiachongfenhunyunxibao。
三、微載體培養的優勢
chanyehuaxibaopeiyangshouxianxuyaotigongzugoudadexibaoshengchangmianji,shipeiyangrongqidanweirongjisuotigongdexibaoshengchangmianjiyousuozengjia,congertigaoyimiaoheshenghuazhijidechanliang;其次需要加強和改善細胞培養的環境,有利於細胞生長;第di三san,細xi胞bao的de均jun一yi化hua程cheng度du要yao高gao,在zai一yi個ge大da發fa酵jiao罐guan內nei培pei養yang細xi胞bao,生sheng長chang環huan境jing需xu一yi致zhi。要yao滿man足zu以yi上shang三san點dian要yao求qiu,常chang規gui的de培pei養yang瓶ping靜jing態tai培pei養yang,甚shen至zhi是shi轉zhuan瓶ping都dou很hen難nan滿man足zu,而er微wei載zai體ti培pei養yang技ji術shu則ze能neng很hen好hao的de解jie決jue這zhe些xie問wen題ti。
總結
綜上所述,微載體的優勢可以歸納為以下幾點:表麵積/體積大,單位體積培養液的細胞產率高;把懸浮細胞和貼壁細胞培養融合在一起,兼有兩者的優點;可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表麵的生長情況;簡化細胞生長過程中對各種環境因素的檢測和控製,重現性好;培養基利用率較高;放大容易;細胞收獲過程不複雜;勞動強度小;培養係統占地麵積和空間小等。
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