基礎培養基

絕大多數培養基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎上
，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。最廣泛應用的培養基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸
，維生素的範圍亦很廣，另外常規含有無機鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12 這兩種培養基各取1/2
，形成神經生物學最通用的培養基。Dulbecco`s改良培養基――DMEM
，現應用於快速生長的細胞
，同MEM含有相同的營養成分，但濃度高出2~4bei。xuanzemouzhongpeiyangji，yingzaixilejiechengfenbiao

，yingzhidaodaduoshuqingxingxiapeiyangjidouyoubuzu。liru，youxiepeiyangjizaianjisuanzhongbaokuoyouguansuan，erzhezhongpeiyangjisuiguangfanyongyushenjingshengwuxuelingyu
，dantaduimouxieduiguansuanmingandekenengyouxibaowaiduxingsunshangdeshenjingyuaneryan，zebingfeizuijiaxuanze，tebieshiruguoshenjingyuanshengchangzaiquefajiaozhidehuanjingzhongshi。F12中含有硫酸亞鐵，據報道也有神經毒效應。
在zai所suo有you這zhe些xie培pei養yang基ji中zhong

，穀gu氨an酸suan比bi其qi他ta氨an基ji酸suan有you更geng高gao的de濃nong度du

，這zhe是shi因yin為wei它ta具ju有you不bu穩wen定ding性xing以yi及ji在zai許xu多duo細xi胞bao培pei養yang中zhong它ta常chang用yong作zuo碳tan源yuan。對dui於yu神shen經jing元yuan的de培pei養yang常chang常chang在zai基ji礎chu培pei養yang基ji中zhong增zeng加jia葡pu萄tao糖tang的de含han量liang到dao0.6%或者加入丙酮酸（若培養基中這兩種物質缺乏時）。MEM與F12均要用5%的CO2來平衡，DMEM含更高濃度的NaCO3

，要用10%的CO2來平衡，當然也可以在較低CO2濃nong度du下xia使shi用yong。這zhe些xie基ji礎chu培pei養yang基ji的de組zu成cheng成cheng分fen是shi建jian立li在zai對dui不bu同tong細xi胞bao係xi生sheng長chang的de研yan究jiu之zhi上shang的de，但dan通tong常chang在zai原yuan代dai培pei養yang中zhong使shi用yong也ye能neng有you比bi較jiao令ling人ren滿man意yi的de結jie果guo。
原則上，HEPES作為緩衝劑可用來代替碳酸氫鹽，以解除需要高濃度CO2培養環境的限製。實際操作中並非如此簡單。顯然，溶解的CO2與碳酸氫鹽對良好的細胞生長是重要的。Leiboviz`s L15培養基可用來在大氣環境中令神經細胞生長，該培養基采用了與眾不同的BSS作基礎
，它含有高濃度的氨基酸來提高緩衝能力，培養基中使用半乳糖作碳源，以阻止培養基中乳酸形成
，少量溶解的CO2由丙酮酸代謝產生。這一培養基的優點是明顯的，特別是在保持較高CO2有困難時，例如在長時間的顯微操作及生理學研究中。L15培養基已用來成功的培養了外周神經元

，但尚未在CNS神經元的發育研究中全麵檢測過。

血清

xibaozaidanchundejichupeiyangjizhongbunengcunhuo，zaiteshuleixingdexibaopeiyangzhongbixutigongmouxiehenliangyingyangwuzhijishengchangyinzicainengshixibaodeyishengchangbingweichishengchangzhuangtai。jichupeiyangjichangchangyaotianjiaxueqing，xueqingzhongnongduduowei5~20%。teshuyongtudexueqinglaiyuanxuyongjingyanqueding，guangfanyingyongdexueqingzhongleiyoumaxueqingyutainiuxueqing。tainiuxueqingzhongfuhanyousifenlieyinzi，changxuanqizuozengzhixibaoyongdexueqing，yeyongyuxibaoxiheyuandaipeiyang。ermaxueqingchangchangyonglaizuoyousifenliehoudeshenjingyuanpeiyang。raner，henduorenyejiangtainiuxueqingyongyushenjingyuanpeiyang，yeyourenyongmaxueqinglaipeiyangjiaozhixibao。yongdashujinxingshenjingyuanpeiyangdemouxieyanjiuzhexihuanshiyongtongxingxueqing
；人類的胎盤血清
，亦曾用於神經組織的器官類型的培養
，也用在一些特殊培養種類中。
血xue清qing的de不bu同tong批pi號hao含han有you不bu同tong的de成cheng分fen，所suo以yi許xu多duo人ren發fa現xian
，應ying該gai在zai使shi用yong前qian對dui血xue清qing進jin行xing測ce試shi。大da多duo數shu試shi劑ji商shang提ti供gong樣yang品pin
，所suo滿man意yi的de批pi號hao即ji可ke選xuan用yong
，這zhe樣yang可ke以yi一yi次ci得de到dao足zu夠gou一yi年nian用yong量liang的de血xue清qing
，血xue清qing在zai使shi用yong前qian通tong常chang在zai56℃加熱30分鍾，這一過程稱為滅活。

無血清培養基

1979nianshenjingxibaopeiyangchuxianleyigezhongyaojinzhan

，yonghuaxuetianjiajijikeweichishenjingxibaocunhuoyushengchangerbuxuyaozaipeiyangjizhongtianjiaxueqing。qigongzuojichushiyongheshidejisu、營養物和促貼壁的物質的組合置換培養基中的成分，最後找到了適合大多數細胞培養的試劑配方，該配方稱為N2，專門用於神經細胞培養
，最早是用在B104大鼠神經母細胞瘤細胞係的培養。它的基礎培養基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素
、轉鐵蛋白、黃體酮、腐fu胺an和he硒xi。胰yi島dao素su和he胰yi島dao素su樣yang生sheng長chang因yin子zi對dui於yu大da多duo數shu類lei型xing細xi胞bao的de存cun活huo和he生sheng長chang有you重zhong要yao作zuo用yong，硒xi是shi穀gu胱guang甘gan肽tai產chan生sheng的de合he作zuo因yin子zi，可ke能neng有you助zhu於yu過guo氧yang化hua物wu和he超chao氧yang化hua物wu的de水shui解jie，有you報bao道dao說shuo還hai能neng防fang止zhi細xi胞bao的de光guang照zhao損sun傷shang。隨sui後hou的de其qi他ta配pei方fang如ruN1N3則含有較低濃度的轉鐵蛋白。
未wei料liao到dao的de是shi上shang述shu配pei方fang構gou成cheng的de培pei養yang基ji可ke以yi支zhi持chi神shen經jing母mu細xi胞bao瘤liu細xi胞bao係xi快kuai速su增zeng殖zhi，隨sui後hou又you發fa展zhan了le能neng支zhi持chi原yuan代dai培pei養yang的de各ge種zhong神shen經jing元yuan生sheng長chang的de培pei養yang基ji，這zhe種zhong培pei養yang基ji在zai許xu多duo實shi驗yan室shi裏li已yi取qu代dai了le有you血xue清qing培pei養yang。在zai某mou些xie培pei養yang方fang案an中zhong，細xi胞bao直zhi接jie進jin入ru無wu血xue清qing培pei養yang
，這zhe樣yang的de培pei養yang基ji可ke以yi消xiao除chu來lai自zi血xue清qing的de不bu均jun一yi性xing。更geng為wei重zhong要yao的de是shi
，它ta們men可ke用yong來lai檢jian測ce生sheng長chang因yin子zi以yi及ji其qi他ta促cu進jin神shen經jing元yuan存cun活huo或huo生sheng長chang的de因yin子zi，或huo者zhe用yong來lai檢jian測ce那na些xie可ke保bao護hu神shen經jing元yuan免mian遭zao環huan境jing毒du物wu損sun傷shang的de製zhi劑ji。專zhuan用yong於yu神shen經jing元yuan的de培pei養yang基ji在zai某mou些xie培pei養yang環huan境jing中zhong還hai可ke以yi減jian低di非fei神shen經jing元yuan細xi胞bao的de增zeng殖zhi
，故gu可ke使shi神shen經jing元yuan純chun化hua。
xueqingzhonghanyoudezufen
，liruxueqingdanbai，kezuoweidaixieduwuqingchujishiyongbingnengjujiyupeiyangjizhong。dangquefazhexiechengfenshi，rushenjingyuanzaiwuxueqingpeiyangjizhongshengchangshi，tebierongyiweiguoyanghuawujiziyoujishanghai，zheyibeixuduoyanjiuzhezhuyidaole。guoyanghuawumeiyijichaoyanghuawuqihuameikezuzhipeiyangjizhongguoyanghuawuhechaoyanghuawudeleiji
，youbaodaojiangkeyicujindimidupeiyangxibaodecunhuo。youxuezhefaxianxibaocunhuokeweiyangfenyadexiajiangercujin。yiner
，wuxueqingpeiyangjidepeifangchanghanyoukangyanghuajideshiji。liru，weishengsuE和he丙bing酮tong酸suan，可ke作zuo為wei過guo氧yang化hua物wu清qing除chu劑ji使shi用yong。上shang述shu這zhe些xie影ying響xiang在zai高gao密mi度du培pei養yang時shi變bian小xiao
，特te別bie是shi神shen經jing元yuan與yu膠jiao質zhi共gong培pei養yang時shi，它ta們men可ke以yi吸xi收shou和he代dai謝xie神shen經jing元yuan毒du性xing物wu質zhi如ru穀gu氨an酸suan。
應ying該gai注zhu意yi，盡jin管guan無wu血xue清qing培pei養yang基ji是shi有you化hua學xue限xian定ding性xing的de
，但dan在zai培pei養yang過guo程cheng中zhong它ta仍reng有you變bian動dong
，培pei養yang起qi始shi時shi可ke能neng有you些xie物wu質zhi缺que乏fa，而er後hou細xi胞bao的de產chan物wu可ke能neng積ji累lei，從cong而er使shi培pei養yang基ji的de成cheng分fen改gai變bian。這zhe其qi實shi是shi有you另ling一yi方fang麵mian的de好hao處chu，即ji條tiao件jian培pei養yang基ji（已培養過細胞的培養基）的形成
，條件培養基常常用來增加神經元和膠質細胞的發育。
生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)哺(bu)乳(ru)類(lei)胚(pei)胎(tai)神(shen)經(jing)元(yuan)有(you)嚴(yan)格(ge)的(de)營(ying)養(yang)要(yao)求(qiu)，若(ruo)不(bu)能(neng)提(ti)供(gong)適(shi)宜(yi)的(de)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)或(huo)合(he)適(shi)的(de)因(yin)子(zi)組(zu)分(fen)
，將(jiang)會(hui)使(shi)絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)神(shen)經(jing)元(yuan)在(zai)體(ti)外(wai)培(pei)養(yang)的(de)數(shu)天(tian)中(zhong)死(si)亡(wang)。解(jie)決(jue)這(zhe)一(yi)問(wen)題(ti)有(you)兩(liang)條(tiao)思(si)路(lu)，一(yi)是(shi)讓(rang)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)提(ti)供(gong)自(zi)己(ji)的(de)營(ying)養(yang)因(yin)子(zi)，二(er)是(shi)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)加(jia)入(ru)純(chun)的(de)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)。如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)混(hun)合(he)物(wu)能(neng)在(zai)高(gao)密(mi)度(du)時(shi)生(sheng)長(chang)，所(suo)需(xu)的(de)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)便(bian)會(hui)積(ji)累(lei)到(dao)可(ke)觀(guan)的(de)數(shu)值(zhi)，尤(you)其(qi)當(dang)培(pei)養(yang)基(ji)很(hen)少(shao)變(bian)化(hua)時(shi)。若(ruo)某(mou)種(zhong)細(xi)胞(bao)混(hun)合(he)物(wu)生(sheng)長(chang)時(shi)有(you)很(hen)少(shao)的(de)營(ying)養(yang)需(xu)求(qiu)

，可(ke)保(bao)持(chi)培(pei)養(yang)基(ji)在(zai)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)裏(li)不(bu)作(zuo)任(ren)何(he)變(bian)動(dong)，以(yi)使(shi)營(ying)養(yang)（生長）因子積累，而最後促使所需要的細胞類型能夠生長。但是，這種對營養（生長）yinzizishenyilaixingyiyoubiduan
，yinweitongchangzaihunhexibaoquntizhongxibaohennanyoutongbilizengzhi，mouxiexibaohuiyinshengchangtiaojiandepinfaershouxianzhi。lingwai
，zhezhongfangfazhinengjinxingxiangdanggaomidudexibaopeiyang。yinweipeiyangjidetiaojianzaixibaodejiaodimidushibiandebugouyouxiao。buguomouxieshihouchunhuashenjingyuanquntidedimidupeiyangkeyongtiaojianpeiyangji（經過了高密度培養）進行
，或在膠質上生長的神經元所用過的培養基來支持。
滿足神經元營養需求的第二條途徑是向培養基中加入生長因子。通常用於組培的通用適宜因子是神經生長因子NGF。不過，隻有少數對這種蛋白質有反應的細胞類型的細胞才能生長。
許多PNS類型的神經元在離體狀態時表現出簡單的營養需求
，隻需提供單一的營養因子就足以使其在低密度時增殖。例如，大鼠交感神經元僅需NGF即能存活
，在其生存期間
，這些神經元可在嚴格局限條件下生長好幾個月（即在無血清培養基中
、或缺乏膠質細胞
、或在化學限定基質上）。有證據表明NGF是活體中交感神經元存活的生理調節因子。然而，交感神經元也對來自膠質細胞的神經營養因子（GDNF）有反應，還有NT3、LIF與CNTF也對其有作用。在不產生GDNF或NT3的動物中，交感神經元會有損傷。在離體與活體營養需求之間的差別或許可以用在不同環境中NGF含量和分布的不同來解釋，培養中的NGF彌散在整個環境中，而在活體內，大部分區域的含量是有限的。因此，NGF的de重zhong要yao性xing在zai於yu其qi合he適shi的de濃nong度du。盡jin管guan在zai大da多duo數shu實shi驗yan中zhong已yi經jing習xi慣guan了le營ying養yang因yin子zi的de最zui大da效xiao應ying使shi用yong量liang，其qi他ta營ying養yang因yin子zi的de協xie同tong效xiao應ying在zai亞ya優you劑ji量liang下xia更geng容rong易yi觀guan察cha到dao。此ci外wai
，高gao濃nong度du的de營ying養yang因yin子zi可ke使shi細xi胞bao更geng能neng抵di抗kang毒du劑ji以yi及ji其qi他ta壓ya力li。相xiang應ying的de，低di濃nong度du的de營ying養yang因yin子zi可ke能neng用yong來lai檢jian查zha表biao現xian型xing
，例li如ru對dui自zi由you基ji或huo氨an基ji酸suan的de毒du性xing刺ci激ji劑ji量liang的de反fan應ying。有you許xu多duo其qi他ta的dePNSpeiyangxitongzhixudanyiyingyangyinzijiukeshiyoushiyongjiazhidexibaobaochizaiyidingbili
，guangweirenzhideyouchujijiezhuangzizhushenjingjieshenjingyuanhedashubeigenshenjingjieganjiaoshenjingyuan。buguo，zhexiemoxingyeyoujuxianxing。liru，peiyangzhongdejiezhuangshenjingjiedeshenjingyuanjiaruCNTF時，超過90%的神經元能存活一個很長時期
，但並未有跡象表明它屬於內源的靶細胞來源的營養因子，而是有爭論的相關分子
，GPA，扮演了這一角色。大鼠背根神經節含有好幾種細胞群體，其中小細胞群、包括nocioceptive cell，對NGF有反應
，但其他神經元，例如大細胞群中的proprioception 卻對不同的神經營養因子有反應。因此，在大多條件下培養物的生長並不能忠實反映親代群體的所有特性，這一問題在CNS的細胞培養中特別突出，因為已有的經驗表明，沒有一種培養基能適合於所有類型及亞類的神經細胞的生長。
現有的證據已表明，CNS神經元的營養需求比PNS的de更geng複fu雜za。對dui脊ji髓sui運yun動dong神shen經jing元yuan與yu視shi網wang膜mo節jie細xi胞bao神shen經jing元yuan的de研yan究jiu表biao明ming，這zhe些xie神shen經jing元yuan與yu外wai周zhou神shen經jing元yuan相xiang比bi能neng對dui更geng為wei廣guang泛fan的de營ying養yang因yin子zi起qi反fan應ying。例li如ru，至zhi少shao發fa現xian了le15種不同的分子可在離體條件下增加神經元的存活。而且
，已觀察到運動神經元與視網膜對任何單獨的營養因子的存活反應
，與PNS中(zhong)所(suo)觀(guan)察(cha)到(dao)的(de)典(dian)型(xing)反(fan)應(ying)相(xiang)比(bi)，都(dou)要(yao)小(xiao)得(de)多(duo)。因(yin)此(ci)，大(da)多(duo)數(shu)影(ying)響(xiang)運(yun)動(dong)神(shen)經(jing)元(yuan)及(ji)視(shi)網(wang)膜(mo)節(jie)細(xi)胞(bao)的(de)營(ying)養(yang)因(yin)子(zi)僅(jin)僅(jin)隻(zhi)能(neng)支(zhi)持(chi)神(shen)經(jing)元(yuan)的(de)亞(ya)群(qun)，而(er)神(shen)經(jing)元(yuan)的(de)最(zui)佳(jia)存(cun)活(huo)要(yao)求(qiu)諸(zhu)多(duo)因(yin)子(zi)的(de)結(jie)合(he)。在(zai)視(shi)網(wang)膜(mo)節(jie)細(xi)胞(bao)的(de)培(pei)養(yang)中(zhong)
，因(yin)子(zi)的(de)最(zui)佳(jia)組(zu)合(he)（如BDNF、CNTF、IGF、bFGF）包括了來自不同生長因子家族的代表。這一結果的普遍性尚待進一步的證實，但敲除單一的營養因子基因之後，沒有表現出對CNS大da多duo類lei群qun的de神shen經jing元yuan的de存cun活huo產chan生sheng太tai大da影ying響xiang，這zhe一yi觀guan察cha與yu上shang述shu的de事shi實shi是shi一yi致zhi的de。現xian已yi知zhi少shao突tu膠jiao質zhi細xi胞bao的de長chang期qi存cun活huo也ye需xu要yao眾zhong多duo營ying養yang因yin子zi的de相xiang互hu作zuo用yong。

抗生素

在細胞培養中最常用的抗生素是青黴素（常用濃度是25~100ui/ml）與鏈黴素（25~100μg/ml）。這兩種抗生素常混合使用。在一些實驗室裏，它們常規加入所有的培養基中。慶大黴素（10~100μg/ml）通(tong)常(chang)有(you)廣(guang)譜(pu)抗(kang)菌(jun)效(xiao)應(ying)，並(bing)具(ju)有(you)溶(rong)液(ye)穩(wen)定(ding)性(xing)，故(gu)也(ye)被(bei)一(yi)些(xie)實(shi)驗(yan)室(shi)使(shi)用(yong)，特(te)別(bie)是(shi)當(dang)有(you)低(di)水(shui)平(ping)的(de)汙(wu)染(ran)存(cun)在(zai)時(shi)更(geng)是(shi)這(zhe)樣(yang)。以(yi)上(shang)這(zhe)些(xie)試(shi)劑(ji)對(dui)黴(mei)菌(jun)與(yu)酵(jiao)母(mu)菌(jun)的(de)汙(wu)染(ran)均(jun)無(wu)效(xiao)。
jinguanhenduoshiyanshizaixibaoxidepeiyangjizhongchangguijiarukangshengsuzuojidaipeiyang，danrengjianyibuyaozaiyuandaipeiyangzhongjiarukangshengsu，qiliyouzhiyishihuodedexibaoshiwujunde，yuandaipeiyangshidexijunwuranhenshaofasheng。qici，jinguanrenweikangshengsuduixibaodaixiedeyingxiangkehulve
，danzuihaobimianshiyongtamen，yimianxibaoshengchanghuanjingdebuwending。zuizhongyaodeshiyaoyishidaopeiyangzhongzhuyaowuranwudeleixing
，tamentongchanganshilewentidelaiyuan。

抗有絲分裂劑

某些DNA合成抑製劑對分裂細胞有毒，但對沒有DNA合成的細胞僅有輕微影響。由於神經元通常缺乏DNAhechengnengli，yinciduikangyousifenliejimeiyouduodafanying。zheyangdeshijichangchangyongyushenjingyuandepeiyang，yixiaochuhuojianshaofeishenjingyuanqunti。ruoyaoshasisuoyoudefeishenjingyuanxibao
，keyixianjiaruxueqinghuoshengchangyinzilaibaozhengyougaobilidefeishenjingyuanxibaojinxingDNAhecheng
，cishizaijiarukangyousifenlieji。danshi，mouxiexibaozaitadexibaozhouqidemouxieshixiangshiduikangyousifenliejishibumingande。buguo，keyizhongfudejiangkangyousifenliejishiyongyuzengzhidexibaoqunti。zaiCNS神經元的培養中抗有絲分裂劑常常在星形細胞形成單層後加入，此時
，星形細胞由於接觸抑製而終止了DNA的合成（即細胞停止增殖），它(ta)們(men)不(bu)會(hui)因(yin)抗(kang)有(you)絲(si)分(fen)裂(lie)劑(ji)的(de)加(jia)入(ru)而(er)死(si)亡(wang)。原(yuan)代(dai)培(pei)養(yang)中(zhong)用(yong)這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)阻(zu)止(zhi)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)的(de)過(guo)度(du)增(zeng)殖(zhi)是(shi)十(shi)分(fen)必(bi)要(yao)的(de)。有(you)兩(liang)種(zhong)抗(kang)有(you)絲(si)分(fen)裂(lie)劑(ji)常(chang)用(yong)於(yu)神(shen)經(jing)元(yuan)的(de)培(pei)養(yang)：Fluorodexyuridine，是胸苷合成酶抑製劑，一般使用濃度為～10μM。尿苷（10μM）也常使用
，可阻止不分裂細胞的RNA合成。另外
，阿糖胞苷也常被使用，其使用濃度為5～50μM。shiyongrenheyizhongkangyousifenlieji，doubixukaolvtadeshenjingyuanduxing
，yinggaiquedingzuidixiaoyingdeshiyongnongdu。etangbaoganzaihendidenongduxia，yehuiduimouxiezhongleideshenjingyuanyouduxing，keyizaochengtedingshenjingyuandesiwang。qitadekangyousifenliejishangweibiaoxianchuzhezhongduxing。

培養的保持

培養物是應該保持在孵箱中的。孵箱可以自動將O2與CO2混(hun)合(he)很(hen)快(kuai)達(da)到(dao)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)設(she)計(ji)要(yao)求(qiu)，空(kong)氣(qi)中(zhong)的(de)氧(yang)濃(nong)度(du)比(bi)血(xue)液(ye)和(he)腦(nao)脊(ji)液(ye)中(zhong)要(yao)高(gao)得(de)多(duo)。對(dui)於(yu)某(mou)些(xie)細(xi)胞(bao)的(de)生(sheng)長(chang)，包(bao)括(kuo)神(shen)經(jing)原(yuan)，應(ying)使(shi)氧(yang)含(han)量(liang)處(chu)在(zai)一(yi)個(ge)較(jiao)低(di)的(de)水(shui)平(ping)。可(ke)以(yi)用(yong)孵(fu)箱(xiang)達(da)到(dao)這(zhe)個(ge)標(biao)準(zhun)
，但(dan)這(zhe)樣(yang)的(de)孵(fu)箱(xiang)並(bing)未(wei)廣(guang)泛(fan)使(shi)用(yong)。
高(gao)濕(shi)度(du)可(ke)避(bi)免(mian)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)蒸(zheng)發(fa)，保(bao)持(chi)孵(fu)箱(xiang)中(zhong)的(de)濕(shi)度(du)通(tong)常(chang)是(shi)在(zai)箱(xiang)底(di)部(bu)放(fang)上(shang)一(yi)大(da)盆(pen)水(shui)，這(zhe)水(shui)應(ying)該(gai)經(jing)常(chang)換(huan)，乘(cheng)水(shui)容(rong)器(qi)應(ying)經(jing)常(chang)消(xiao)毒(du)以(yi)防(fang)黴(mei)菌(jun)生(sheng)長(chang)。若(ruo)孵(fu)箱(xiang)曾(zeng)被(bei)黴(mei)菌(jun)孢(bao)子(zi)嚴(yan)重(zhong)汙(wu)染(ran)過(guo)，那(na)麼(me)要(yao)想(xiang)完(wan)全(quan)去(qu)除(chu)汙(wu)染(ran)則(ze)會(hui)非(fei)常(chang)困(kun)難(nan)。當(dang)培(pei)養(yang)物(wu)必(bi)須(xu)要(yao)長(chang)期(qi)保(bao)持(chi)在(zai)孵(fu)箱(xiang)中(zhong)時(shi)，應(ying)采(cai)用(yong)較(jiao)少(shao)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)瓶(ping)、皿，且將蓋子蓋緊以避免蒸發，或采用相應的按比例供空氣的孵箱。
溫度的精確調節應定期檢查
，孵箱溫度常設置為37℃或較低溫度。細胞在低溫時可有較長時間的忍耐限度，但當溫度升至39℃時
，幾小時內即死亡。
維(wei)持(chi)培(pei)養(yang)物(wu)的(de)最(zui)佳(jia)方(fang)案(an)常(chang)常(chang)改(gai)變(bian)。例(li)如(ru)培(pei)養(yang)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao)時(shi)，要(yao)經(jing)常(chang)換(huan)液(ye)以(yi)使(shi)其(qi)增(zeng)殖(zhi)達(da)到(dao)最(zui)大(da)。而(er)在(zai)培(pei)養(yang)某(mou)些(xie)神(shen)經(jing)原(yuan)時(shi)

，則(ze)要(yao)求(qiu)盡(jin)可(ke)能(neng)少(shao)的(de)換(huan)液(ye)，神(shen)經(jing)原(yuan)在(zai)兩(liang)次(ci)換(huan)液(ye)之(zhi)間(jian)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)長(chang)的(de)最(zui)好(hao)。大(da)腦(nao)皮(pi)質(zhi)的(de)培(pei)養(yang)要(yao)求(qiu)在(zai)不(bu)換(huan)液(ye)的(de)情(qing)形(xing)下(xia)維(wei)持(chi)一(yi)個(ge)月(yue)以(yi)上(shang)。另(ling)一(yi)方(fang)麵(mian)，象(xiang)海(hai)馬(ma)神(shen)經(jing)原(yuan)那(na)樣(yang)的(de)細(xi)胞(bao)
，倚(yi)賴(lai)於(yu)條(tiao)件(jian)培(pei)養(yang)基(ji)，若(ruo)換(huan)液(ye)太(tai)頻(pin)繁(fan)細(xi)胞(bao)就(jiu)會(hui)衰(shuai)退(tui)，此(ci)時(shi)，可(ke)采(cai)用(yong)1/3或1/2換液的方式。