1.安瓿管準備

　　安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安部管時，先用2%鹽酸浸泡過夜，自來水衝洗幹淨後，用蒸餾水浸泡至pH中性，幹後、貼上標簽，標上菌號及時間，加入脫脂棉塞後，121℃下高壓滅菌15-20分鍾
，備用。

　　2.保護劑的選擇和準備

　　保護劑種類要根據微生物類別選擇。配製保護劑時，應注意其濃度及 pH值，以及滅菌方法。如血清，可用過濾滅菌;牛奶要先脫脂，用離心方法去除上層油脂，一般在100℃間歇煮沸2-3次，每次10-30分鍾，備用。

　　3.凍幹樣品的準備

　　在zai最zui適shi宜yi的de培pei養yang條tiao件jian下xia將jiang菌jun種zhong培pei養yang至zhi靜jing止zhi期qi或huo成cheng熟shu期qi，進jin行xing純chun度du檢jian查zha後hou，與yu保bao護hu劑ji混hun合he均jun勻yun
，分fen裝zhuang。微wei生sheng物wu培pei養yang物wu濃nong度du以yi細xi胞bao或huo孢bao子zi不bu少shao於yu 108-1010個ml為宜(以大腸杆菌為例
，為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升，隻需10毫升瓊脂斜麵兩支)。

　　4.預凍

　　般預凍2小時以上，溫度達到-20℃到-35℃左右。

　　5.冷凍幹燥

　　采用冷凍幹燥機進行冷凍幹燥。

　　將冷凍後的樣品安部管置於冷凍幹燥機的幹燥箱內，開始冷凍幹燥，時間一般為8-20小時。