針對目前國內持續升溫的禽腺病毒感染,本文總結了信得科技從2013年至今對禽腺病毒的研究概況,文中分別從臨床症狀、病理剖檢、血清學和分子流行病學調查等方法,闡述了當前我國家禽普遍存在的腺病毒感染,一是禽腺病毒不同血清型在我國不同省份的分布情況;二是分離的禽腺病毒的分群、血清型和基因型情況;三是各血清型禽腺病毒對家禽的危害情況。
腺病毒科是一類中等大小無囊膜的線狀單分子雙股DNA病毒,第一株禽腺病毒是從牛結節性皮炎的病料中分離到。1949年Vanden Ende分離到一株禽腺病毒,以後又從雞胚中無意分離到了多株雞胚致死性孤兒病毒(CELO)。
1、腺病毒的分類
腺病毒科根據形態結構、免疫學特性和宿主範圍可劃分為兩個屬:哺乳動物腺病毒屬和禽腺病毒屬。禽腺病毒根據其抗原結構不同分為3個群。Ⅰ群主要是傳統的禽腺病毒,代表株是雞胚致死性孤兒病毒(CELO),它們共享有一種共同的群特異性抗原,其中從雞分離到的12個血清型(FAV1-12),火雞兩個血清型(FAV1-2),鵝三個血清型(GAV1-3)和鴨2個血清型。Ⅱ群禽腺病毒包括火雞出血性腸炎病毒(HEV)、大理石脾病毒和雞大脾病毒,它們與Ⅰ群禽腺病毒無抗原相關性。Ⅲ群禽腺病毒目前隻有一個成員,即降蛋綜合征病毒(EDSV),它們隻是部分的含有Ⅰ群禽腺病毒的共同抗原。腺病毒的分類是根據血清型或基因型來劃分的。病毒的血清性根據中核試驗來確定,Zsak等利用L1-L4四個高變環的特點和RFLP技術把Ⅰ群禽腺病毒劃分為A-E五個基因型。並且指出了致病性毒株之間在基因型上存在著某種基因的相關性。
2、禽腺病毒形態結構和理化特性
禽腺病毒沒有囊膜,由12個五鄰體構成二十麵體頂角殼粒,五鄰體由2條纖突組成。此外,二十麵體的非頂角殼粒稱為六鄰體(Hexon),該六鄰體蛋白對禽腺病毒分型至關重要,是抗原結合位點成分。
禽腺病毒中Ⅰ群CELO病毒能夠凝集大鼠紅細胞,而不能凝集禽類的紅細胞,部分毒株可凝集綿羊紅細胞;Ⅱ群禽腺病毒無血凝性報道;Ⅲ群禽腺病毒EDSV可以凝集雞、鴨、鵝、火雞、鴿等禽類的紅細胞。由於沒有囊膜,所以禽腺病毒對外界環境抵抗力比較強,對乙醚、氯仿、胰蛋白酶、酚和乙酸均有抵抗力,可耐受PH3-9,在1:1000濃度甲醛中可被滅活,本病毒對碘製劑、次氯酸鈉和戊二醛敏感。歐福迪泡沫消毒劑由於含有戊二醛有效成分,可有效殺滅病原。

3、禽腺病毒的流行病學與致病性
腺病毒大部分為長期潛伏病毒,引起無症狀的感染,其中部分可以引起致病。Ⅰ群禽腺病毒存在於多種禽類的呼吸道和消化道,作為原發病原引起發病,往往與其他病毒CAV、IBDV等混合感染致病。引起雞包涵體肝炎的腺病毒病原已經確定,多為Ⅰ群禽腺病的幾個血清型混合感染所致。
病毒主要存在於雞的眼、上呼吸道以及消化道,但大多呈隱性感染不發病。病毒主要在消化道和上呼吸道內複製,糞便、腸道、病變肝髒、腎髒和咽等均含有病毒。病毒主要通過雞胚垂直傳播,從感染雞群的雞胚或雛雞所製備的細胞分離物中可使病毒暴露出來。病毒通常在3周齡以上排出,在肉雞,排出病毒的高峰是4-6周;產蛋雞在5-9周,到14周齡後仍有70%可排毒。在同一農場中可同時存在幾個不同的血清型。病毒可經糞便、氣管和鼻腔粘膜水平傳播,病雞常無明顯症狀,僅見萎頓、蹲伏、羽毛蓬鬆、肉髯和麵部皮膚蒼白,生長不良。剖檢為肝炎,肝色淡質脆、腫大,肝和骨骼肌有出血點,在肝細胞中有大而圓或不規則的嗜堿性或嗜酸性核內包涵體。

從送檢來看,全國相當一部分地區出現了疑似病例,問題比較突出,最先在東部沿海省份,山東、江蘇、遼寧省份的白羽肉雞上和種雞上檢測到病原。後來陸續在內陸省份,河南、安徽、河北和山西分離到病原。白羽肉雞、蛋雞、種雞、麻雞上都有發生,死亡情況因地區、品種而異。

臨床上,病雞突然性的精神沉鬱,羽毛蓬鬆,腹瀉,貧血,消瘦,最後死亡。剖檢發現肝髒腫大、質脆、易碎,肝周炎,心包積液,膠凍樣,脾髒有白色壞死點,氣管有出血和粘液、肺髒淤血嚴重,個別病例腺胃有出血點,法氏囊全部有乳白色幹酪樣物,腎髒呈現樹枝狀充血。
4、分子生物學診斷
將送檢病料進行雞胚接種,提取DNA,利用腺病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群分群引物和Ⅰ群腺病毒分型引物(FAV1-12)進行RT-PCR擴增,如圖所示:均能得到禽腺病毒目的條帶。

將條帶基因進行膠回收,測序,進化分析如下:

從分群角度對分離株進行規整可以看到新分離的禽腺病毒毒株都屬於Ⅰ群禽腺病毒,但是它們的血清型和基因型並不相同,通過對分離株基因型和血清型分析如下:

對Ⅰ群的禽腺病毒進行血清型和基因型分析,發現我國主要流行A、B、C三種基因型,共6個血清型(火雞1型、1型、4型、5型、8a/b型),但是近期在豫南、皖北、蘇北、魯西北和膠東地區流行的禽腺病毒主要是血清4型和8a/bxing,zaochengjiqundesiwanglvjiaogao,fabingji,youmanyandequshi。muqian,xindekejiqinbingjiancezhongxinyijingduizhoubianquyujinxinglequyangshaizha,yibianzhangkongzuixindeliuxingdongtai。
由於Ⅰ群禽腺病毒的12gexueqingxingjiaochabaohuxingjiaocha,suoyizaifangkongshangbixuxuanyongyuliuxingzhupipeideyimiaozhucainengyouxiaoezhiyiqingdemanyan。danshi,muqianshichangshangmeiyoushangpinhuadeyimiao,yixiechangjiahegetiyanghushengchandezijiamiaocunzaiyanzhongdesandufengxian,tongguowomenduishichangbingliaodejiance,faxianjihu90%的雞群存在腺病毒、法氏囊、白血病、網wang內nei兩liang兩liang,三san三san混hun合he感gan染ran,所suo以yi自zi家jia苗miao在zai使shi用yong的de同tong時shi也ye起qi著zhe傳chuan播bo病bing原yuan的de作zuo用yong,當dang時shi雖sui然ran控kong製zhi住zhu了le病bing情qing的de發fa展zhan,但dan隨sui之zhi而er來lai的de是shi免mian疫yi抑yi製zhi病bing的de出chu現xian,後hou期qi一yi些xie列lie的de問wen題ti也ye會hui隨sui之zhi而er來lai。所suo以yi我wo們men不bu建jian議yi使shi用yong腺xian病bing毒du疫yi苗miao進jin行xing該gai病bing的de防fang控kong,最zui好hao使shi用yong正zheng規gui生sheng產chan的de精jing製zhi卵luan黃huang抗kang體ti,它ta不bu散san毒du,起qi效xiao快kuai,方fang便bian使shi用yong,是shi控kong製zhi腺xian病bing毒du的de首shou選xuan。

注:H9代表禽流感H9亞型,ND代表雞新城疫,IB代表雞傳染性支氣管炎,IBD代表雞法氏囊,ALV代表雞白血病,CAV代表雞傳染性貧血,REV代表雞網狀內皮組織增殖症,FAV代表雞腺病毒。
在禽腺病毒的防控上,我們提幾點建議:
① 疫苗預防:必須選用正規廠家生產的禽腺病毒疫苗,必須包括當前我國流行的禽腺病毒主要的4種血清型,另外,必須沒有禽白血病病毒、雞傳染性貧血病毒、網狀內皮組織增殖征病毒和法氏囊病毒等外源病毒汙染。
② 卵黃抗體:就目前來說,精製卵黃抗體是治療禽腺病毒感染的最有效方案,粗製抗體由於雜質較多,容易造成機體過大的應激反應。
在zai以yi上shang兩liang種zhong方fang案an應ying用yong的de同tong時shi,配pei合he抗kang病bing毒du藥yao物wu幹gan擾rao素su對dui腺xian病bing毒du效xiao果guo較jiao好hao,期qi間jian用yong信xin必bi妥tuo增zeng強qiang機ji體ti免mian疫yi力li。由you於yu腺xian病bing毒du對dui福fu爾er馬ma林lin和he戊wu二er醛quan等deng消xiao毒du劑ji敏min感gan,對dui於yu禽qin舍she,應ying該gai做zuo好hao環huan境jing衛wei生sheng消xiao毒du工gong作zuo,防fang止zhi病bing毒du的de擴kuo散san和he傳chuan播bo。
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