1.目的

規範無菌室的使用管理，保持無菌室的衛生環境，保證微生物檢測結果的準確性。

2.適用範圍

適用於實驗室無菌室的使用和管理。

3.職責

3.1實驗室檢驗員負責無菌室的日常使用、維護。

3.2實驗室領班負責無菌室的管理。

3.3部長負責對無菌室管理情況進行監督檢查。

4.內容及要求

4.1準備工作

4.1.1 無菌室的準備

4.1.1.1 無菌室應設有無菌操作間
、緩衝間和更衣室，無菌操作間潔淨度應達到10000級
，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超淨台潔淨度應達到100級。

4.1.1.2 無菌室經常保持清潔，每次使用前用紫外燈照射或臭氧消毒30分鍾以上方可使用，並且同時打開超淨台進行吹風。

4.1.1.3 無菌室應備有工作濃度的消毒液，如75%酒精、0.1%的新潔爾滅溶液等。

4.1.1.4 無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防汙染。

4.1.1.5 無菌室要求最大限度保持無菌狀態
，禁止在無菌室以內從事與微生物檢測操作無關的活動。

4.1.2 著裝準備

4.1.2.1無菌室用工作服、帽、鞋
、口罩用前必須經過紫外燈或臭氧消毒，無菌室的工作服應經常清洗
，保持整潔。

4.1.2.2進入無菌室要穿專用無菌工作服、帽、鞋、口罩，不準將無菌室的工作服、鞋、帽穿出室外。

4.1.3操作人員準備

操作人員在進行無菌操作前
，雙手必須進行洗手消毒（75%酒精
、0.1%新潔爾滅溶液等）。非操作人員嚴禁進入無菌室。

4.2 操作要求

4.2.1 需要帶入無菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品
，均應包紮嚴密，並應經過適宜的方法滅菌。

4.2.2 待檢樣品在檢查前，應保持外包裝完整
，不得開啟
，以防汙染。

4.2.3 進入無菌室後，隨手關好門，操作過程中嚴禁人員出入。

4.2.4 無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)應(ying)在(zai)超(chao)淨(jing)台(tai)上(shang)進(jin)行(xing)，每(mei)次(ci)操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)
，均(jun)應(ying)做(zuo)空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)試(shi)驗(yan)樣(yang)
，以(yi)檢(jian)查(zha)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)的(de)可(ke)靠(kao)性(xing)。檢(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)檢(jian)測(ce)規(gui)程(cheng)進(jin)行(xing)，確(que)保(bao)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)準(zhun)確(que)無(wu)誤(wu)。

4.2.5 儀器、器械、平皿等物品需從傳遞窗口傳入無菌室。

4.2.6 如有菌液或樣品灑在超淨台上，應立即用75%的酒精棉球擦拭幹淨
，在消毒處理。

4.2.7 滅菌後物品放在指定位置
，注明滅菌日期
，高壓滅菌物品可存放3天，過期不能再用，需重新包裝滅菌。

4.3 清洗要求

4.3.1 帶有菌液的吸管、試管、培養皿等器皿應浸泡在盛有0.1%新潔爾滅溶液或其它消毒溶液的消毒桶內消毒。

4.3.2 凡帶有活菌的物品，必須經消毒後，才能在水龍頭下衝洗
，嚴禁汙染下水道。

4.3.3 操作完畢，台內物品全部取出並用消毒液噴灑消毒，用後的物品歸位，垃圾帶出無菌室，再用紫外燈輻照20分鍾。

4.4無菌室的清潔消毒

4.4.1 無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔淨度符合要求。

4.4.2 無菌室應每月檢查菌落數。在超淨工作台開啟的狀態下，取無菌培養皿分別放置工作位置的左中右等處
，開蓋暴露15分鍾後
，倒置於36℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級超淨台平板雜菌數平均不得超過1個菌落
，10000級無菌操作間平均不得超過3個菌落。如超過限度
，應對無菌室進行徹底消毒
，直至重複檢查合乎要求為止。

4.4.3 除每日進行清潔和使用前的殺菌之外，要根據空白樣的檢測情況
，及時對無菌室進行徹底的熏蒸或消毒。