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材料及試劑 ：
a)新鮮豚鼠血
b)兔紅細胞（RRBC）
c)溴花二氨基異硫氫化物（AET）
d)淋巴細胞分層液
e)其它Hanks液，含小牛血清的199培養液，無菌生理鹽水，3.5%氯化鈉溶液，離心機等。
方法：
1.AET—RRBC製備
（1）.AET溶液的製備
稱取AET粉劑402毫克，溶於10毫升蒸餾水中，使成為0.143M溶液，用4NNaOH溶液調pH9.0。該溶液必須新鮮配製，不宜久存。
（2）.AET處理RRBC
取洗滌好壓積的RRBC，按一份壓積AET—RRBC加入4份新鮮配製的pH9.0的AET溶液充分混勻置37℃水浴15分鍾，每隔5分鍾搖勻一次。取出加冷無菌生理鹽水至離心管 口（1—2厘米）1800轉/分離心5分鍾。連續洗滌3—5次，每洗一次，必須充分搖勻，以減少AET—RRBC粘附成團，並觀察有無溶血。若有溶血現象，則用含小牛血清的199培養基再洗一次，最後配成10%AET—RRBC懸液，置4℃保存，不得超過5天。
（3）.1%AET—RRBC的配製：
將預先配製並保存於4℃冰箱的10%濃度的AET—RRBC，以含10%小牛血清的199培養液稀釋至1%。
2.從新鮮豚鼠血液分離單個核細胞，操作見後試驗。
3.AET—E花環試驗：
將分離的單個核細胞（2ⅹ106/毫升）與等量1%AET—RRBC混合，置37℃水浴 15分鍾，每隔5分鍾搖勻一次，分裝數管，每管2—3毫升，低速離心（1000轉/分鍾）5分鍾後，移至4℃冰箱45分鍾。
4.T淋巴細胞和B淋巴細胞的分離
將形成E—花環的細胞懸液，再用淋巴細胞分層液分離，吸取界麵雲霧狀的細胞，即為富含B淋巴細胞群。沉澱於管底的E—花環，用Hanks液洗一次後，加雙蒸水3毫升處理3分鍾，低滲裂解E—花環周圍的RRBC，立即加3.5%氯化鈉溶液1毫升，使還原為等滲，低速離心沉澱，即得富含T淋巴細胞群。
