xibaopeiyangshizhijiangxibaocongdongwuhuozhiwutineiquchu，ranhouzaishiyiderengonghuanjingzhongshengchangdeguocheng。xibaokeyizaipeiyangqianzhijiecongzuzhizhongquchubingtongguomeihuojixie方法進行解離，也可以來源於已建立的細胞係或細胞株。細胞常規培養是在細胞房中進行
，在超淨工作台或生物安全櫃中，把細胞處理好，根據需要加入細胞培養基，放入細胞培養瓶/皿或細胞培養板中，再放到帶有5% CO₂ 的37℃恒溫培養箱中培養。

細xi胞bao培pei養yang過guo程cheng中zhong如ru果guo操cao作zuo不bu當dang或huo者zhe條tiao件jian控kong製zhi不bu合he適shi容rong易yi受shou到dao化hua學xue或huo者zhe生sheng物wu因yin素su的de汙wu染ran。凡fan混hun入ru細xi胞bao培pei養yang環huan境jing中zhong對dui細xi胞bao生sheng存cun有you害hai的de成cheng分fen和he造zao成cheng細xi胞bao不bu純chun的de異yi物wu都dou應ying視shi為wei汙wu染ran，細xi胞bao汙wu染ran不bu能neng全quan被bei消xiao除chu
，但dan能neng減jian少shao其qi發fa生sheng的de頻pin率lv和he後hou果guo的de嚴yan重zhong性xing。細xi胞bao汙wu染ran根gen據ju汙wu染ran源yuan主zhu要yao可ke以yi分fen為wei化hua學xue性xing，物wu理li性xing和he生sheng物wu性xing汙wu染ran。

  微生物汙染

由(you)於(yu)體(ti)外(wai)培(pei)養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)自(zi)身(shen)沒(mei)有(you)抵(di)抗(kang)汙(wu)染(ran)的(de)能(neng)力(li)
，而(er)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)加(jia)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)抗(kang)汙(wu)染(ran)能(neng)力(li)也(ye)是(shi)有(you)限(xian)的(de)，因(yin)而(er)細(xi)胞(bao)微(wei)生(sheng)物(wu)汙(wu)染(ran)一(yi)旦(dan)發(fa)生(sheng)往(wang)往(wang)是(shi)無(wu)法(fa)挽(wan)救(jiu)的(de)。一(yi)般(ban)在(zai)細(xi)胞(bao)受(shou)到(dao)汙(wu)染(ran)早(zao)期(qi)或(huo)汙(wu)染(ran)較(jiao)輕(qing)時(shi)，能(neng)及(ji)時(shi)處(chu)理(li)並(bing)除(chu)去(qu)汙(wu)染(ran)物(wu)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)還(hai)有(you)可(ke)能(neng)得(de)到(dao)挽(wan)救(jiu)。

不bu同tong的de微wei生sheng物wu汙wu染ran物wu對dui細xi胞bao的de影ying響xiang也ye有you差cha別bie
，微wei生sheng物wu中zhong支zhi原yuan體ti和he病bing毒du對dui細xi胞bao形xing態tai和he技ji能neng的de影ying響xiang是shi長chang期qi的de
，緩huan慢man的de和he潛qian在zai的de。而er黴mei菌jun和he細xi菌jun增zeng殖zhi迅xun速su
，能neng在zai很hen短duan的de時shi間jian內nei抑yi製zhi細xi胞bao生sheng長chang或huo產chan生sheng有you毒du物wu質zhi殺sha滅mie細xi胞bao。

1
、黴菌汙染

種zhong類lei很hen多duo，汙wu染ran的de多duo是shi曲qu黴mei菌jun，白bai色se念nian珠zhu菌jun
，酵jiao母mu菌jun



，黑hei黴mei菌jun

，孢bao子zi菌jun等deng。黴mei菌jun汙wu染ran後hou多duo數shu在zai培pei養yang液ye中zhong形xing成cheng淡dan黃huang色se或huo是shi白bai色se的de漂piao浮fu物wu
，一yi般ban肉rou眼yan可ke見jian，較jiao易yi被bei發fa現xian，短duan期qi內nei培pei養yang液ye多duo不bu變bian混hun濁zhuo。倒dao置zhi顯xian微wei鏡jing下xia可ke以yi看kan見jian細xi胞bao之zhi間jian有you縱zong橫heng交jiao錯cuo穿chuan行xing的de絲si狀zhuang，樹shu枝zhi狀zhuang或huo管guan狀zhuang菌jun絲si，並bing漂piao浮fu在zai培pei養yang液ye中zhong。很hen多duo菌jun絲si在zai高gao倍bei鏡jing下xia可ke以yi看kan見jian鏈lian狀zhuang排pai列lie的de菌jun株zhu。念nian珠zhu菌jun及ji酵jiao母mu菌jun菌jun株zhu呈cheng卵luan圓yuan形xing，散san在zai細xi胞bao上shang及ji細xi胞bao周zhou邊bian生sheng長chang。

處理：確認是黴菌汙染，如果細胞種類不是特別珍貴
，直接放棄，並將實驗環節消毒。

2、細菌汙染

細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)較(jiao)常(chang)見(jian)的(de)有(you)大(da)腸(chang)杆(gan)菌(jun)
，白(bai)色(se)葡(pu)萄(tao)球(qiu)菌(jun)，假(jia)單(dan)孢(bao)菌(jun)等(deng)。加(jia)用(yong)抗(kang)菌(jun)素(su)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)可(ke)預(yu)防(fang)和(he)排(pai)除(chu)個(ge)別(bie)一(yi)般(ban)少(shao)量(liang)細(xi)菌(jun)的(de)汙(wu)染(ran)。一(yi)旦(dan)發(fa)生(sheng)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)很(hen)容(rong)易(yi)發(fa)現(xian)，多(duo)數(shu)情(qing)況(kuang)下(xia)培(pei)養(yang)液(ye)短(duan)時(shi)間(jian)內(nei)變(bian)黃(huang)

，表(biao)明(ming)有(you)大(da)量(liang)酸(suan)性(xing)物(wu)質(zhi)產(chan)生(sheng)，出(chu)現(xian)明(ming)顯(xian)渾(hun)濁(zhuo)現(xian)象(xiang)；youshijingzhidepeiyangyeqichubuhun
，danshaojiazhendang，jiuyouxuduohunzhuowupiaoqi。daozhixianweijingxiaguancha
，kejianpeiyangyezhongyoudaliangyuanqiuzhuangkeliwupiaofu，youshizaixibaobiaomianjizhouweiyoudaliangxijuncunzai，xibaotingzhishengchangbingyouzhongdubiaoxian。biyaoshikequshaoliangpeiyangyetupianransejianzhayimingquexijunzhonglei；有的培養液改變不明顯而有疑似汙染，亦可向肉湯培養基內陸入少量培養液，37℃培養以檢測。

處理：一般用抗生素的常用量的5~10倍作衝擊療法，用藥24~48xiaoshihouzaihuanchangguipeiyangye，youshizaizaoqiwuranshicifayouxiao。xibaopeiyangzhongyongkangshengsuduoweiyufangxijunwuran，yibanduolianheyingyong。yidanfashengwuranhouzaishiyongkangshengsuchangchangnanyichudiao，youdekangshengsuzhiyouyijunzuoyongerwushajunxiaoying。

3、支原體汙染

支原體是一種大小介於細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)並獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性.可為圓形、絲狀或梨形。

支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。多數支原體適合於偏堿條件下生存(PH7.6-8.0)，對酸耐受性差。對熱比較敏感
，對一般抗生素不敏感。

支原體汙染細胞後.培養液可不發生混濁.多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著
，細微變化也可由於傳代、換液而緩解.因此易被忽視。但個別嚴重者
，可致細胞增殖緩慢.甚至從培養器皿脫落。為確定有無支原體汙染可做如下檢測：

a:相差顯微境檢測；b:熒光染色法；c:電鏡檢查
；d:DNA分子條文檢查或支原體培養等方法。處理：市場上有多種支原體清除試劑盒，效果比較好。

4、酵母汙染

酵母到處存在
，並能在合適的環境中快速生長。酵母汙染很容易觀察到，培養物變渾濁，尤其在後期。一般PH值變化很小
，嚴重時，PH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒，有些會芽生較小顆粒。

5、病毒汙染

組織細胞培養過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會產生病毒汙染。目前
，從原代猴腎細胞的培養中已發現不少於20種血清性病毒。

盡管病毒汙染的細胞不影響原代培養，但生產疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、幹擾素等生物製品製作中的難題。

6、細胞交叉汙染

細xi胞bao汙wu染ran和he細xi菌jun汙wu染ran不bu同tong，細xi胞bao汙wu染ran是shi由you於yu在zai培pei養yang過guo程cheng中zhong各ge種zhong細xi胞bao同tong時shi進jin行xing，而er所suo用yong器qi具ju或huo液ye體ti混hun雜za使shi用yong所suo致zhi。這zhe種zhong汙wu染ran沒mei有you微wei生sheng物wu存cun在zai，但dan使shi培pei養yang細xi胞bao不bu同tong種zhong類lei之zhi間jian發fa生sheng混hun亂luan，細xi胞bao生sheng長chang特te性xing
，形xing態tai發fa生sheng變bian化hua。有you些xie變bian化hua輕qing微wei，不bu易yi察cha覺jiao，有you些xie則ze可ke能neng由you於yu汙wu染ran的de細xi胞bao具ju有you生sheng長chang優you勢shi而er最zui終zhong壓ya過guo原yuan來lai細xi胞bao而er導dao致zhi細xi胞bao生sheng長chang的de抑yi製zhi
，最zui終zhong死si亡wang。汙wu染ran過guo的de細xi胞bao由you於yu種zhong類lei不bu純chun，無wu法fa進jin行xing實shi驗yan研yan究jiu。