2) duiyutiebixibao，xiaohuashiyigeguanjianbuzhou。tiebixibaoyoudaoxibaodiaowangshiruyoupiaofuxibao，xushoujipiaofuxibaohetiebixibaohouhebingranse。chulitiebixibaoshiyaoxiaoxincaozuo
，jinliangbimianrenweidesunshangxibao。yimeixiaohuashijianguoduan，xibaoxuyaoyonglichuidacainengtuoluo
，rongyizaochengxibaomodesunshang， 蛋白質電泳分子量標準試劑PI攝入過多;消化時間過長
，細胞膜同樣易造成損傷
，甚至會影響細胞膜上磷脂酰絲氨酸與Annexin V-FITC的(de)結(jie)合(he)。消(xiao)化(hua)時(shi)將(jiang)胰(yi)酶(mei)鋪(pu)滿(man)孔(kong)板(ban)底(di)後(hou)，輕(qing)搖(yao)時(shi)胰(yi)酶(mei)與(yu)細(xi)胞(bao)充(chong)分(fen)接(jie)觸(chu)
，然(ran)後(hou)倒(dao)掉(diao)大(da)部(bu)分(fen)胰(yi)酶(mei)，利(li)用(yong)剩(sheng)餘(yu)的(de)少(shao)量(liang)胰(yi)酶(mei)再(zai)消(xiao)化(hua)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)
，待(dai)細(xi)胞(bao)間(jian)空(kong)隙(xi)增(zeng)大(da)，瓶(ping)底(di)呈(cheng)花(hua)斑(ban)狀(zhuang)即(ji)可(ke)終(zhong)止(zhi)。在(zai)消(xiao)化(hua)液(ye)中(zhong)盡(jin)量(liang)不(bu)用(yong)EDTA
，EDTA會影響Annexin V與PS的結合。

3) 實驗中如需要固定細胞
，比如在檢測凋亡的同時檢測細胞周期，隻能選用Annexin V-FITC
，而不能選用Annexin V-EGFP
，因為在固定過程中EGFP會變性導致喪失激發熒光的能力。固定前需要先將細胞與Annexin V-FITC進行孵育，並用binding buffer洗掉未結合的Annexin V-FITC。因為固定過程中細胞通透性增加會產生細胞碎片，可以和Annexin V結合
，對結果產生幹擾。

4) 如果樣品來源於血液，請務必除去血液中的血小板。 蛋白質電泳分子量標準試劑因為血小板含有PS，能與Annexin V結合
，從而幹擾實驗結果。可以使用含有EDTA的緩衝劑並在200 g離心洗去血小板。

5) 試劑在開蓋前請短暫離心
，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

6) Annexin V-FITC和PI是光敏物質
，在操作時請注意避光。