流式細胞儀是進行流式細胞分析的儀器,集電子、計算機、激光、流體理論於一體,被譽為試驗室的“CT”。
流式細胞術(Flow CytoMeter,FCM)shiyizhongzaigongnengshuipingshangduidanxibaohuoqitashengwulizijinxingdingliangfenxihefenxuandejianceshouduan,takegaosufenxishangwangexibao,bingnengtongshicongyigexibaozhongcededuogecanshu,yuchuantongyingguangjingjianzhaxiangbi,juyousudukuai、精度高、準確性好等優點, 成為當代最先進的細胞定量分析技術。
工作原理
jiangdaicexibaoransehouzhichengdanxibaoxuanye。yongyidingyalijiangdaiceyangpinyaruliudongshi,buhanxibaodelinsuanhuanchongyezaigaoyaxiacongqiaoyeguanpenchu,qiaoyeguanrukoufangxiangyudaiceyangpinliuchengyidingjiaodu,zheyang,qiaoyejiunenggoubaoraozheyangpingaosuliudong,zuchengyigeyuanxingdeliushu,daicexibaozaiqiaoyedebaobeixiadanxingpailie,yicitongguojiancequyu。
liushixibaoyitongchangyijiguangzuoweifaguangyuan。jingguojujiaozhengxinghoudeguangshu,chuizhizhaoshezaiyangpinliushang,beiyingguangransedexibaozaijiguangshudezhaoshexia,chanshengsansheguanghejifayingguang。zheliangzhongxinhaotongshibeiqianxiangguangdianerjiguanhe90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大小;熒光信號的接受方向與激光束垂直,經過一係列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號。
這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表麵抗原的強度或其核內物質的濃度,經光電倍增管接收後可轉換為電信號,再通過A/D轉(zhuan)換(huan)器(qi),將(jiang)連(lian)續(xu)的(de)電(dian)信(xin)號(hao)轉(zhuan)換(huan)為(wei)可(ke)被(bei)計(ji)算(suan)機(ji)識(shi)別(bie)的(de)數(shu)字(zi)信(xin)號(hao)。計(ji)算(suan)機(ji)把(ba)所(suo)測(ce)量(liang)到(dao)的(de)各(ge)種(zhong)信(xin)號(hao)進(jin)行(xing)計(ji)算(suan)機(ji)處(chu)理(li),將(jiang)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)顯(xian)示(shi)在(zai)計(ji)算(suan)機(ji)屏(ping)幕(mu)上(shang),液(ye)可(ke)以(yi)打(da)印(yin)出(chu)來(lai),還(hai)可(ke)以(yi)數(shu)據(ju)文(wen)件(jian)的(de)形(xing)式(shi)存(cun)儲(chu)在(zai)硬(ying)盤(pan)上(shang)以(yi)備(bei)日(ri)後(hou)的(de)查(zha)詢(xun)或(huo)進(jin)一(yi)步(bu)分(fen)析(xi)。
檢測數據的顯示視測量參數的不同由多種形式可供選擇。單參數數據以直方圖的形式表達,其X軸為測量強度,Y軸為細胞數目。一般來說,流式細胞儀坐標軸的分辨率有512或1024通道數,這視其模數轉換器的分辨率而定。對於雙參數或多參數數據,既可以單獨顯示每個參數的直方圖,也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體視圖。
細xi胞bao的de分fen選xuan是shi通tong過guo分fen離li含han有you單dan細xi胞bao的de液ye滴di而er實shi現xian的de。在zai流liu動dong室shi的de噴pen口kou上shang配pei有you一yi個ge超chao高gao頻pin電dian晶jing體ti,充chong電dian後hou振zhen動dong,使shi噴pen出chu的de液ye流liu斷duan裂lie為wei均jun勻yun的de液ye滴di,待dai測ce定ding細xi胞bao就jiu分fen散san在zai這zhe些xie液ye滴di之zhi中zhong。將jiang這zhe些xie液ye滴di充chong以yi正zheng負fu不bu同tong的de電dian荷he,當dang液ye滴di流liu經jing帶dai有you幾ji千qian伏fu特te的de偏pian轉zhuan板ban時shi,在zai高gao壓ya電dian場chang的de作zuo用yong下xia偏pian轉zhuan,落luo入ru各ge自zi的de收shou集ji容rong器qi中zhong,不bu予yu充chong電dian的de液ye滴di落luo入ru中zhong間jian的de廢fei液ye容rong器qi,從cong而er實shi現xian細xi胞bao的de分fen離li。
應用範圍
用於白血病的分型、腫瘤細胞染色體的異倍性測定,以及免疫學研究,並已開始用於細菌鑒定,病毒感染細胞的識別和愛滋病感染者T4、T8細胞的記數。
隨著流式細胞技術水平的不斷提高,其應用範圍也日益廣泛。流式細胞術已普遍應用於免疫學、血液學、腫瘤學、細胞生物學、細胞遺傳學、生物化學等臨床醫學和基礎醫學研究領域。
技術特點
流式細胞儀作為一種先進的細胞定量分析檢測儀器,設計上采用了許多獨特的技術,其中涉及到液流係統、光路係統、信號測量和細胞分選等4個方麵。
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