分子生物學操作中會涉及一係列儀器，使用不當導致實驗失敗


、jianshaoyiqishiyongshouminghuosunhuaiyiqi。yincizaijinxingcaozuoqianxizhidilejiegezhongyiqideshiyongfangfajizhuyishixiang，shishihoujishiyanshibangongbeideyigebiyaozhunbei。

一、冷凍離心機

低溫分離技術是分子生物學研究中必不可少的手段。基因片段的分離
、酶(mei)蛋(dan)白(bai)的(de)沉(chen)澱(dian)和(he)回(hui)收(shou)以(yi)及(ji)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)的(de)分(fen)離(li)製(zhi)備(bei)實(shi)驗(yan)中(zhong)，都(dou)離(li)不(bu)開(kai)低(di)溫(wen)離(li)心(xin)技(ji)術(shu)，因(yin)此(ci)低(di)溫(wen)冷(leng)凍(dong)離(li)心(xin)機(ji)已(yi)成(cheng)為(wei)分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)研(yan)究(jiu)中(zhong)必(bi)需(xu)的(de)重(zhong)要(yao)工(gong)具(ju)。

使用方法：

1.離心機應放置在水平堅固的地板或平台上，並力求使機器處於水平位置以免離心時造成機器震動。 

2.打開電源開關，按要求裝上所需的轉頭，將預先以托盤天平平衡好的樣品放置於轉頭樣品架上(離心筒須與樣品同時平衡)
，關閉機蓋。 

3.按功能選擇鍵
，設置各項要求：溫度、速度
、時間、加速度及減速度
，帶電腦控製的機器還需按儲存鍵，以便記憶輸入的各項信息。 

4.按啟動鍵，離心機將執行上述參數進行運作，到預定時間自動關機。 

5.待(dai)離(li)心(xin)機(ji)完(wan)全(quan)停(ting)止(zhi)轉(zhuan)動(dong)後(hou)打(da)開(kai)機(ji)蓋(gai)，取(qu)出(chu)離(li)心(xin)樣(yang)品(pin)

，用(yong)柔(rou)軟(ruan)幹(gan)淨(jing)的(de)布(bu)擦(ca)淨(jing)轉(zhuan)頭(tou)和(he)機(ji)腔(qiang)內(nei)壁(bi)
，待(dai)離(li)心(xin)機(ji)腔(qiang)內(nei)溫(wen)度(du)與(yu)室(shi)溫(wen)平(ping)衡(heng)後(hou)方(fang)可(ke)蓋(gai)上(shang)機(ji)蓋(gai)。

注意事項：

1.機體應始終處於水平位置
，外接電源係統的電壓要匹配，並要求有良好的接地線。 

2.開機前應檢查轉頭安裝是否牢固，機腔有無異物掉入。 

3.樣品應預先平衡，使用離心筒離心時離心筒與樣品應同時平衡。 

4.揮發性或腐蝕性液體離心時
，應使用帶蓋的離心管，並確保液體不外漏
，以免腐蝕機腔或造成事故。 

5.擦拭離心機腔時動作要輕，以免損壞機腔內溫度感應器。 

6.每次操作完畢應作好使用情況記錄
，並定期對機器各項性能進行檢修。 

7.離心過程中若發現異常現象
，應立即關閉電源
，報請有關技術人員檢修。

附：相對離心力與每分鍾轉速的換算

lixinjidezhuansu，zaiyiqianshiyanziliaozhongyibanyimeifenzhongduoshaozhuanlaibiaoshi。youyulixinlibujinweizhuansuhanshu，yiweilixinbanjingdehanshu，jizhuansuxiangtongshi，lixinbanjingyuechang，chanshengdelixinliyueda。yincijinyizhuansubiaodalixinlishibugoukexuede，jinnianlaizhuzhangyongxiangduilixinli(RCF)來表示比較合理。現在國際資料中，已改用相對離心力來表示。

二、PCR擴增儀

目前各公司提供的PCR儀操作方法各有不同，按其操作說明進行操作。

值(zhi)得(de)提(ti)出(chu)的(de)是(shi)

，在(zai)使(shi)用(yong)一(yi)定(ding)時(shi)期(qi)後(hou)，樣(yang)品(pin)孔(kong)的(de)實(shi)際(ji)溫(wen)度(du)與(yu)儀(yi)器(qi)顯(xian)示(shi)溫(wen)度(du)有(you)時(shi)會(hui)有(you)較(jiao)大(da)差(cha)異(yi)，應(ying)當(dang)請(qing)廠(chang)商(shang)的(de)技(ji)術(shu)支(zhi)持(chi)人(ren)員(yuan)校(xiao)對(dui)儀(yi)器(qi)的(de)各(ge)項(xiang)性(xing)能(neng)。 

三、數字式酸度計

【一】、準備工作

1.儀器應平放在符合使用環境的工作台上
，依視覺角度支起支架。

2.pH值的定位測量法： 

(一)二點定位法(高精度測量方法) 

(1) 連接好電極線路，將參比電極及活化滿24h以上清潔的PH電極移入第一標準緩衝液pH1中(例pH1=4.00)，待儀器響應穩定後，調節定位旋鈕至儀器顯示為“0.00”； 

(2) 將電級係統從第1種標準液中取出，用去離子水衝洗幹淨後以濾紙吸幹電級表麵水份
，移入第2種標準液(例pH2=9.18)中
，儀器響應穩定後，調節斜率旋鈕，使儀器顯示為(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此後斜率旋鈕不可再動
，除非更換電極係統
； 

(3) 斜率調節完成後，重新調節定位旋鈕
，使儀器顯示第2種標準液的實際pH值(9.18)

，至此2點定位結束； 

(4) 將電極從第2種標準液中取出衝洗、吸幹後移入待測溶液中
，儀器響應穩定後顯示的數值即為待測溶液的pH值。 

(二)一點定位法(粗略測量法) 

(1) 將溫度補償旋鈕調至溶液溫度值； 

(2) 向左將斜率補償旋鈕旋轉至頭； 

(3) 將電級係統移入標準液中(一點法僅用一種標準液
，如pH=4.00時)，調節定位旋鈕使儀器顯示“4.00”
； 

(4) 取出電級衝洗吸幹水分後移至待測溶液中

，儀器響應穩定後顯示的數值即為待測溶液的pH值。

(三)溫度的測量

1.將功能選擇撥至溫度檔。

2.將溫度探頭插入插孔，並將溫度探頭置於環境條件或溶液中，儀器響應穩定後儀器顯示值即為環境條件或溶液溫度值。 

(四)注意事項 

1.認真做好儀器使用前準備工作。 

2.儀器通電後或測量過程中出現顯示不穩或亂跳現象，應切斷電源進行檢查




，如電壓、預熱時間及電極係統等是否正常。 

3.使用不同電極應注意排除離子的幹擾，選擇好鹽橋，必要時應使用離子強度固定劑。 

4.電極係統從第1種溶液取出移入第2種溶液之前
，須用去離子水或雙蒸水清洗幹淨，再用濾紙吸幹表麵水分，以免影響測定結果的準確性。 

5.儀器應存放於幹燥
、清潔無腐蝕的場所，每次測量結束後應關閉電源
，退出電極及溫度探頭妥善保存。玻璃電極清洗後可浸於去離子水待用(注意水麵不得低於玻璃球泡)
，甘汞電極清潔後套上橡皮帽置於配套盒中保存
，當甘汞電極內充液泄漏或不飽和及鹽橋中斷時
，應及時補充飽和內充液。 

6.該類儀器均采用大規模集成電路

，輸入阻值較高，在對儀器內部進行任何零部件修理焊接時，應使用45W以下有良好地線的烙鐵，無接地線烙鐵應撥下電源插頭焊接。

【二】、pH(酸堿度)測量

1.將功能選擇撥至“pH”檔，調節定位旋扭
，斜率補償旋鈕及溫度補償旋鈕顯示值應有相應變化。 

2.通過儀器溫度檔測定標準液及待測樣品液溫度(要求兩種液體溫度保持一致，以減少測定誤差)，並用溫度補償旋鈕調節至溶液實際溫度值。

四
、分光光度計

不(bu)同(tong)物(wu)質(zhi)對(dui)不(bu)同(tong)波(bo)長(chang)入(ru)射(she)光(guang)的(de)吸(xi)收(shou)程(cheng)度(du)各(ge)不(bu)相(xiang)同(tong)，從(cong)而(er)形(xing)成(cheng)特(te)征(zheng)性(xing)的(de)吸(xi)收(shou)光(guang)譜(pu)。分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法(fa)不(bu)僅(jin)適(shi)應(ying)於(yu)可(ke)見(jian)光(guang)區(qu)，同(tong)時(shi)還(hai)可(ke)擴(kuo)展(zhan)至(zhi)紫(zi)外(wai)光(guang)區(qu)及(ji)紅(hong)外(wai)光(guang)區(qu)，因(yin)此(ci)給(gei)科(ke)研(yan)實(shi)驗(yan)帶(dai)來(lai)了(le)極(ji)大(da)方(fang)便(bian)。下(xia)麵(mian)重(zhong)點(dian)介(jie)紹(shao)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)的(de)使(shi)用(yong)及(ji)注(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)。

使用規則：

1.接通穩壓器電源，待穩壓器輸出電壓穩定至200V後打開光度計電源
，儀器自動進入初始化。 

2.初始化約需時10 min
，內容包括：①尋找零級光；②建立基線；③最後當顯示器指示××nm時，
，表明儀器完成初始化程序，可進入檢測狀態。 

3.按要求輸入各項參數，選擇相應比色杯(玻璃或石英)，將空白管、標準管及待測管依次放入比色皿架內
，關上比色池蓋。 

4.以空白管自動調零。 

5.試樣槽依次移至樣品位置，待數據顯示穩定後按“START/STOP”鍵，打印機自動打印所測數據
，重複上述步驟，直到所有樣品檢測完畢。 

6.檢測結束後應及時取出比色杯
，並清洗幹淨放回原處，同時關上儀器電源開關及穩壓器電源開關
，做好使用情況登記。

注意事項：

1.儀器初次使用或使用較長時間(一般為一年)，需檢查波長準確度
，以確保檢測結果的可靠性。 

2.youyuchangtuyunshuhuoshineibanyunkenengzaochengguangyuanweizhipianyi，daozhiliangdianliupiaoyizengda。cishiduiguangyuanweizhijinxingtiaozheng，zhizhidadaoyouguanjishuzhibiaoweizhi。ruojingtiaozhengxiaozhenghoubochangzhunquedu、暗電源漂移及亮電流漂移三項關鍵指標仍未符合要求，則應停止使用，並及時通知有關技術人員檢修。 

3.每次檢測結束後應檢查比色池內有否溶液溢出
，若有溢出應隨時用濾紙吸幹
，以免引起測量誤差或影響儀器使用壽命。 

4.儀器每次使用完畢，應於燈室內放置數袋矽膠(或其它幹燥劑)，以免反射鏡受潮黴變或沾汙，影響儀器使用，同時蓋好防塵罩。 

5.儀器室應通常保持潔淨幹燥，室溫以5-35℃為宜，相對溫度不得超過85%。有條件者應於室內配備空調機及除濕機，以確保儀器性能穩定。 

6.儀器室不得存放酸、堿、揮發性或腐蝕性等物質

，以免損壞儀器。 

7.儀器長時間不用時，應定時通電預熱，每周1次，每次30min，以保證儀器處於良好使用狀態。

五
、電泳儀

電(dian)泳(yong)技(ji)術(shu)是(shi)分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)研(yan)究(jiu)不(bu)可(ke)缺(que)少(shao)的(de)重(zhong)要(yao)分(fen)析(xi)手(shou)段(duan)。電(dian)泳(yong)一(yi)般(ban)分(fen)為(wei)自(zi)由(you)界(jie)麵(mian)電(dian)泳(yong)和(he)區(qu)帶(dai)電(dian)泳(yong)兩(liang)大(da)類(lei)，自(zi)由(you)界(jie)麵(mian)電(dian)泳(yong)不(bu)需(xu)支(zhi)持(chi)物(wu)，如(ru)等(deng)電(dian)聚(ju)焦(jiao)電(dian)泳(yong)、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等

，這類電泳目前已很少使用。而區帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物
，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及矽膠-G薄bo層ceng等deng，分fen子zi生sheng物wu學xue領ling域yu中zhong最zui常chang用yong的de是shi瓊qiong脂zhi糖tang凝ning膠jiao電dian泳yong。所suo謂wei電dian泳yong，是shi指zhi帶dai電dian粒li子zi在zai電dian場chang中zhong的de運yun動dong，不bu同tong物wu質zhi由you於yu所suo帶dai電dian荷he及ji分fen子zi量liang的de不bu同tong，因yin此ci在zai電dian場chang中zhong運yun動dong速su度du不bu同tong，根gen據ju這zhe一yi特te征zheng，應ying用yong電dian泳yong法fa便bian可ke以yi對dui不bu同tong物wu質zhi進jin行xing定ding性xing或huo定ding量liang分fen析xi，或huo將jiang一yi定ding混hun合he物wu進jin行xing組zu份fen分fen析xi或huo單dan個ge組zu份fen提ti取qu製zhi備bei，這zhe在zai臨lin床chuang檢jian驗yan或huo實shi驗yan研yan究jiu中zhong具ju有you極ji其qi重zhong要yao的de意yi義yi。電dian泳yong儀yi正zheng是shi基ji於yu上shang述shu原yuan理li設she計ji製zhi造zao的de。下xia麵mian簡jian單dan介jie紹shao其qi使shi用yong方fang法fa及ji注zhu意yi事shi項xiang。

使用方法：

1.首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯接，注意極性不要接反。 

2.電泳儀電源開關調至關的位置，電壓旋鈕轉到最小，根據工作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流範圍。 

3.接通電源，緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止
，設定電泳終止時間，此時電泳即開始進行。 

4.工作完畢後
，應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態，並撥出電泳插頭。

注意事項：

1.電泳儀通電進入工作狀態後，禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分
，也不能到電泳槽內取放東西，如需要應先斷電

，以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端
，以防漏電。 

2.儀(yi)器(qi)通(tong)電(dian)後(hou)，不(bu)要(yao)臨(lin)時(shi)增(zeng)加(jia)或(huo)撥(bo)除(chu)輸(shu)出(chu)導(dao)線(xian)插(cha)頭(tou)，以(yi)防(fang)短(duan)路(lu)現(xian)象(xiang)發(fa)生(sheng)
，雖(sui)然(ran)儀(yi)器(qi)內(nei)部(bu)附(fu)設(she)有(you)保(bao)險(xian)絲(si)，但(dan)短(duan)路(lu)現(xian)象(xiang)仍(reng)有(you)可(ke)能(neng)導(dao)致(zhi)儀(yi)器(qi)損(sun)壞(huai)。 

3.由you於yu不bu同tong介jie質zhi支zhi持chi物wu的de電dian阻zu值zhi不bu同tong，電dian泳yong時shi所suo通tong過guo的de電dian流liu量liang也ye不bu同tong

，其qi泳yong動dong速su度du及ji泳yong至zhi終zhong點dian所suo需xu時shi間jian也ye不bu同tong

，故gu不bu同tong介jie質zhi支zhi持chi物wu的de電dian泳yong不bu要yao同tong時shi在zai同tong一yi電dian泳yong儀yi上shang進jin行xing。 

4.在總電流不超過儀器額定電流時(最大電流範圍)，可以多槽關聯使用，但要注意不能超載，否則容易影響儀器壽命。 

5.mouxieteshuqingkuangxiaxujianzhayiqidianyongshuruqingkuangshi，yunxuzaiwenyazhuangtaixiakongzaikaiji，danzaiwenliuzhuangtaixiabixuxianjiehaofuzaizaikaiji，fouzedianyabiaozhizhenjiangdafudutiaodong，rongyizaochengbubiyaoderenweijiqisunhuai。 

6.使用過程中發現異常現象，如較大噪音
、放電或異常氣味，須立即切斷電源
，進行檢修，以免發生意外事故。

六
、分析天平

分fen析xi天tian平ping是shi定ding量liang分fen析xi工gong作zuo中zhong不bu可ke缺que少shao的de重zhong要yao儀yi器qi

，充chong分fen了le解jie儀yi器qi性xing能neng及ji熟shu練lian掌zhang握wo其qi使shi用yong方fang法fa，是shi獲huo得de可ke靠kao分fen析xi結jie果guo的de保bao證zheng。分fen析xi天tian平ping的de種zhong類lei很hen多duo
，有you普pu通tong分fen析xi天tian平ping
、半自動/全自動加碼電光投影阻尼分析天平及電子分析天平等。下麵就電子分析天平的使用方法及注意事項做一介紹。

操作方法：

1.檢查並調整天平至水平位置。 

2.事先檢查電源電壓是否匹配(必要時配置穩壓器)，按儀器要求通電預熱至所需時間。 

3.預熱足夠時間後打開天平開關，天平則自動進行靈敏度及零點調節。待穩定標誌顯示後，可進行正式稱量。 

4.chengliangshijiangjiejingchengliangpinghuochengliangzhizhiyuchengpanshang，guanshangcemen，qinganyixiaqupijian，tianpingjiangzidongxiaoduilingdian
，ranhouzhujianjiarudaichengwuzhi，zhidaosuoxuzhongliangweizhi。 

5.被稱物質的重量是顯示屏左下角出現“→”標誌時
，顯示屏所顯示的實際數值。 

6.稱量結束應及時除去稱量瓶(紙)，關上側門，切斷電源
，並做好使用情況登記。

注意事項：

1.天平應放置在牢固平穩水泥台或木台上，室內要求清潔
、幹燥及較恒定的溫度，同時應避免光線直接照射到天平上。 

2.稱量時應從側門取放物質，讀數時應關閉箱門以免空氣流動引起天平擺動。前門僅在檢修或清除殘留物質時使用。 

3.電子分析天平若長時間不使用，則應定時通電預熱，每周一次

，每次預熱2h

，以確保儀器始終處於良好使用狀態。 

4.天平箱內應放置吸潮劑(如矽膠)，當吸潮劑吸水變色，應立即高溫烘烤更換，以確保吸濕性能。 

5.揮發性、腐蝕性、強酸強堿類物質應盛於帶蓋稱量瓶內稱量
，防止腐蝕天平。

6.通電前應按工作電源要求檢查電壓是否符合要求，若電源波動太大

，應經交流穩壓後再送接儀器。 

7.電源應用良好接線
，以消除外界幹擾，使用攪拌器時，務必使攪拌器外殼與儀器接地端相連。 

8.接通儀器電源，經10min預熱後，可進行測量工作。