在細菌學診斷工作中,常需要從被檢材料中分離細菌,並獲得純培養(即單獨一種細菌的培養物)。因此,通常要用到離心機對樣品進行離心分離,細菌的離心機分離培養技術是細菌學診斷中的一項重要基本操作。
分離細菌的方法很多,常用的有以下幾種。
將jiang被bei檢jian材cai料liao接jie種zhong於yu適shi宜yi培pei養yang基ji,再zai於yu固gu體ti培pei養yang基ji表biao麵mian生sheng長chang的de菌jun落luo中zhong,選xuan樣yang欲yu分fen離li菌jun的de單dan個ge菌jun落luo,移yi種zhong於yu另ling一yi適shi宜yi培pei養yang基ji中zhong培pei養yang。因yin為wei一yi個ge菌jun落luo通tong常chang由you一yi個ge細xi菌jun生sheng長chang繁fan殖zhi所suo形xing成cheng,故gu培pei養yang出chu的de細xi菌jun是shi單dan一yi的de種zhong類lei,即ji純chun培pei養yang。
用特殊的培養環境(如厭氧、二氧化碳環境等)分離細菌。
jiangbeijiancailiaojiezhongziyigandongwutinei,shibingyuanjunzaidongwutineifanzhi,ranhoucongdongwutineiqucailiaoliyonglixinjijinxinglixinfenlichuxuyaodechengfenhoupeiyang。liyongmouxiexijunduiyixielihuayinsuyouteshudikangli,yonglihuafangfachulijiezhongcailiao,shasiqitaweishengwuerbaocunxuyaodexijun,zaifenlipeiyang。
一般情況下,被檢材料用前兩種方法分離培養即可。如披撿材料汙染嚴重,可先用後兩種方法處理,再用前兩種方法獲得純培養。
在分離培養操作中,嚴格遵守無菌操作。所有用具、培養基、試劑都要經過滅菌,而且不能長時間暴露於空氣中。禁止用手接觸或用口吹已滅菌的器皿內部。
根據被檢材料中可能存在的病原苗的特性,選擇適當的培養基和培養條件:(溫度、氣體環境等)。進行未知菌的初次分離,最好多用幾種培養基,如肉湯、鮮血瓊脂、麥康克瓊脂等,每種培養基接種數管,分別放在普通環境和厭氧環境中培養。一般經過24—78小時觀察結果,但也有一些病原菌,需要培養校長時間才能生長。
被檢材料一般不需要處理,直接按種於培養基上。當懷疑為有芽腦的病原苗時,可將被檢材料加生理鹽水磨碎,作成1:10乳劑(液體材料不必稀釋),置60-80℃水浴中20—30分鍾,以殺死無芽胞的雜菌,然後再接種於培養基中。
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