關鍵詞 乙酰膽堿酯酶(AchE ) 抑製率(inhibition ratio) 快速檢測(quick detection)
隨著人們的生活質量的不斷提高,健康意識不斷加強,中國農產品出口麵臨重大機遇與挑戰的關鍵時期,國家認監委計劃舉辦“第十二屆全國HACCP應用與認證研討會”,可謂廣開言路,對有效控製食品安全事故發生,推進農產品出口,提升HACCP體係理論水平都具有重大意義。在此,筆者談談關於食品加工、流通環節中的關鍵控製點:在原料驗收環節,以及蔬菜、水果市場準入和出入境農殘檢測中,提出加大“乙酰膽堿酯酶抑製率測定蔬菜水果農殘”(以下簡稱“抑製率法”)應用力度的建議,以高效、快捷、低成本保證食品安全、避免引起農產品質量的國際糾紛來增加一道保險;且建議將“抑製率”作為判定是否合格的重要參考數據作為供有關管理部門的執法依據。
抑製率法最早源於西方醫學、nongchanpindenglingyu,guoneiwaidexiangguanwenxianbushao。youdeguojiahuodiqu,rudongnanyajizhongguotaiwanyijiangyizhilvdejiancejieguozuoweipandingnongchanpinshifouyunxujinrushichangliutongdezhongyaoyijuzhiyi。2001年以來,中國出台了《蔬菜上有機磷和安基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測法》標準:NY/T448-2001和GB/T5009-2003。但若幹年來,檢驗檢疫係統、農(nong)業(ye)部(bu)門(men)在(zai)對(dui)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)器(qi)具(ju)和(he)檢(jian)測(ce)人(ren)員(yuan)的(de)培(pei)訓(xun)較(jiao)為(wei)重(zhong)視(shi),在(zai)各(ge)地(di)建(jian)立(li)了(le)大(da)量(liang)的(de)快(kuai)速(su)農(nong)殘(can)站(zhan)。筆(bi)者(zhe)感(gan)覺(jiao)這(zhe)麼(me)好(hao)的(de)方(fang)法(fa),在(zai)應(ying)用(yong)上(shang)還(hai)缺(que)乏(fa)一(yi)定(ding)的(de)力(li)度(du),如(ru)有(you)些(xie)管(guan)理(li)部(bu)門(men)還(hai)未(wei)將(jiang)抑(yi)製(zhi)率(lv)作(zuo)為(wei)執(zhi)法(fa)依(yi)據(ju)。原(yuan)因(yin)是(shi)上(shang)述(shu)兩(liang)個(ge)標(biao)準(zhun)在(zai)抑(yi)製(zhi)率(lv)檢(jian)測(ce)的(de)測(ce)試(shi)方(fang)法(fa)上(shang)本(ben)身(shen)有(you)一(yi)定(ding)的(de)缺(que)陷(xian),導(dao)致(zhi)重(zhong)現(xian)性(xing)較(jiao)差(cha),使(shi)采(cai)信(xin)上(shang)存(cun)在(zai)一(yi)定(ding)的(de)難(nan)度(du)。筆(bi)者(zhe)通(tong)過(guo)實(shi)踐(jian),做(zuo)了(le)技(ji)術(shu)上(shang)的(de)改(gai)進(jin),解(jie)決(jue)了(le)這(zhe)方(fang)麵(mian)的(de)問(wen)題(ti),使(shi)之(zhi)科(ke)學(xue)性(xing)更(geng)強(qiang)。
zhongsuozhouzhi,hegedenongyaozainongchanpindeshengchanzhongshibukequede,ruobushiyongnongyao,nongzuowuzaichengshuqianhuomengyazhuangtaijibenjiubeibingchonghaixiaomiele,daozhinongzuowudejianchanhuojueshou。congmingdexuezheyanjiulekejiangjiedeanquannongyao,zaiyidingdeshijianneiyouduxing,quebaonongzuowubushouchonghai、黴菌和雜草的幹擾,正常健康地生長,隻要嚴格控製休藥期,農產品就安全無毒。每年數十萬噸、價格以億計的農藥用於田間地頭,農藥銷售、種植基地都有專業的植物醫生們做技術指導,但在利益驅動下,不懂科學亂用藥的、或購到假農藥的、追求華麗的外觀不嚴格遵守休藥期的現象難以避免,因此產生了農殘檢測的行業。
xianjinnongcanjiancedeshebeizhuyaoshiqixiangsepuhuoqizhilianyongyideng,zheleishebeinengduinongcanjinxingdingxingdingliangdezhunqueceding,henduoguojiahediqudefaguiduigezhongnongyaoxianliangzhidinglebiaozhun,danjianceshebeijiagejibendouzaishushiwanyuanyishang,haocaifeiyonggaodengzhuduoyinsu,daozhijiancefeigao。muqiantongchanganjiancenongyaozhongleishoufei,meizhongnongyaojiancefeitongchangzai150元到400餘元。農藥的施用隨時間、diqujibinghaibutong,suoyongnongyaozhongleifanduo,zhejiuyaoqiuduinongchanpinyangpinjinxingduozhongnongyaoxiangmudejiance,yigeyangpinjinnongcanxiangmudejiancefeijiugaodayiliangqianyuanshenzhigengduo,jiancefeiyongduoshuqingkuangxiayuanyuangaoyushucaishuiguobenshendelirun,qiecongyangpinsongdadaochujujiancebaogaohaoshichangdashutian,gengchangdedashuyue。yibianshilaodongmijixingdeshengchanzhezhongzhichujiazhizaiyi、兩元一斤的農產品,鮮蔬菜水果保質期短,冷藏可稍微延長;另一邊是昂貴的進口的檢測設備、檢測費,還有一些專門從事農殘檢測的技術人員和漫長的檢測周期,還不等檢測結果出來,蔬菜水果早就變成肥料!特別是食品加工企業的原料檢測,若等檢測結果出來,早已經變質,不能用於食品加工了,失去了檢測意義!這,顯然是一個不等式。
消xiao費fei者zhe對dui所suo購gou的de蔬shu菜cai水shui果guo是shi否fou安an全quan無wu法fa判pan斷duan,無wu力li對dui手shou中zhong一yi把ba兩liang三san元yuan的de菜cai支zhi付fu數shu千qian元yuan的de檢jian測ce費fei。盡jin管guan目mu前qian檢jian測ce設she備bei購gou置zhi及ji檢jian測ce費fei用yong主zhu要yao是shi國guo家jia投tou入ru進jin行xing管guan理li,但dan對dui每mei天tian數shu以yi億yi計ji批pi次ci的de蔬shu菜cai水shui果guo,色se譜pu法fa的de檢jian測ce力li不bu從cong心xin,從cong互hu聯lian網wang中zhong查zha到dao的de數shu據ju表biao明ming,可ke謂wei杯bei水shui車che薪xin,一yi些xie擁yong有you數shu千qian萬wan元yuan設she施shi的de機ji構gou每mei年nian所suo檢jian測ce的de樣yang品pin數shu屈qu指zhi可ke數shu,年nian檢jian測ce萬wan個ge樣yang品pin的de實shi驗yan室shi寥liao寥liao無wu幾ji,能neng檢jian測ce的de農nong藥yao種zhong類lei相xiang當dang局ju限xian,且qie檢jian測ce出chu率lv並bing不bu高gao。一yi次ci,筆bi者zhe用yong酶mei抑yi製zhi法fa對dui某mou地di即ji將jiang上shang市shi的de水shui果guo蔬shu菜cai進jin行xing檢jian測ce,發fa現xian不bu合he格ge率lv相xiang當dang高gao,囑zhu咐fu延yan長chang采cai收shou期qi,以yi確que保bao產chan品pin質zhi量liang與yu安an全quan。
如何來解上麵這個不等式呢?“快速檢測法”的問世,當仁不讓!目前快速主要有“速測卡法”、“抑製率法”,前者一個樣品檢測費通常在一兩元,後者則不超過十元(含人工、設備折舊、房租費),且檢測量越大,成本越低。速測卡法操作簡單,隻要像PHshizhiyiyang,jiangceshizhizaishucaiyangpinshangcajixia,yongshouxindewendupeiyangjifenzhong,guanzhaceshizhideyansebianhua,jiukequedingshifouweinongyaoyangxing,keguangfanyongyutianjianditou,shangfancaigou、大型食品加工、餐館等進貨時的質量把關用。而抑製率所用的設備主要是分光光度計、天平等,價值少則三五千,多則不過萬元的設備就可對大多數蔬菜、水果中的有機磷等農藥殘留是否達到安全指標做出準確判定,通常一個熟練的操作人員30分鍾可檢測4、5個樣品,一兩小時可測出20餘個樣品。
快速檢測用的酶是一種從蒼蠅頭部、或動物如牛、雞的血清中提取物,稱為乙酰膽堿脂酶,對有機磷、安基甲酸酯類農藥極為敏感,在一定條件下與樣本中的農藥反應,可觀查到顏色的變化,或用分光光度計在412nm處chu檢jian測ce顏yan色se的de變bian化hua率lv,若ruo顏yan色se變bian化hua很hen快kuai,宛wan若ruo湖hu裏li的de魚yu歡huan蹦beng亂luan跳tiao,表biao明ming無wu毒du,若ruo顏yan色se基ji本ben不bu變bian,活huo性xing被bei大da大da抑yi製zhi,如ru水shui中zhong的de魚yu基ji本ben翻fan了le肚du子zi,則ze說shuo明ming樣yang本ben中zhong的de農nong藥yao殘can毒du高gao,引yin用yong抑yi製zhi率lv進jin行xing表biao述shu。以yi國guo標biao為wei例li,抑yi製zhi率lv高gao於yu50%為不合格,標準注明與氣相色譜法檢測結果吻合率達80%以上。可以形象理解為,在一塘水池中養100條魚,若死率在50tiaoyishang,zekeyipandingshuizhongyoudu,bunengyinyong,jutishishenmezhongleideduyaosuibunengdingxingyiyang,yizhilvfazhinengpandingshucaishuiguozhongshifouyougaocandu,kenengshiyizhonghuoduozhongnongcanzonglianggongxian,danbunengquedingjutinongyaozhonglei。renmenzhongdianguanzhudeshinengfoushiyong,erbushinongyaozhonglei!抑製率法經濟、快速、高效,剛好解決了上述的不等式問題。
研究表明,原法中不嚴謹導致測量不穩定,與其它檢測一樣,作為所提供的法律數據,檢測需規範嚴謹。
筆者做了如下改進,1、製樣:幹樣品如茶葉類要製成粉,蔬菜水果類水分高的要製成漿,保證樣品的勻一性;2、對提取的分析液增加快速定性濾紙過濾,使溶液清亮透明,因濾紙對緩衝液的吸附作用,所以改樣品中加5ml緩衝液為6ml,且在接過濾液的杯上事先畫好2.5ml刻度線,體積不足時再加少許緩衝液淋洗濾紙及樣品,確保分析液體積基本為2.5ml;3、37℃培養時若因培養箱或水浴加熱過程中蒸發濃縮的要用緩衝液補足2.5ml;4、對於色度過大的吸光度超過光度計讀數限量的,改1cm比色皿為0.5cm;5、出具法律用數據時,取雙杯檢測平均值;6、比色時技巧及注意事項:將培養畢的檢測液置入1cm或0.5cm比皿中讀取吸光度並記錄後,從加入底液起用秒表計時,確保加底液後的顯色反應為準確的3分鍾;對批量樣品的檢測,測吸光度加底液時,從第一個樣加入底液後起計時,按10秒間隔時間按順序依次加入底液的,以便批量操作時能保證每個樣品的反應時間準確為3分鍾時能記錄下吸光度;genjucaozuorenyuanzijideqingkuangkongzhimeicijiadiyedexiansebeishu,quebaojiadiyehouyifenzhonghouliangfenbanzhongneinengshimeibeidounengyicijinliangyaoyun。shijianzhengminggaijinhoudefangfa,zhongxianxinglianghao,cechuyizhilvdayu50%以上的,不確定度小於7%,50%以下的不確定度小於5%,duibiaozhunneitidaodechujizhongyoucijixingganraodeshucaiwai,wanquannengmanzuzhongcaixuyao,qieyuxiangyingdeseputubiduijiweiwenhe。ruoyizhilvfadedaoguangfanyingyongyurenke,huozuoweisepufadeshaizha,duidafujieshengjiancechengben、經費支出有重大意義。
在此筆者還有一個建議,就是將每天食用量較少的,或非每天必食的農產品,如水果類的不合格判定抑製率定為90%以上,與主食的蔬菜類的50%以下為合格予以分別對等待,這也符合國際通行做法,如美國農藥限量中,規定甲基硫菌靈在蔬菜類時限量規定為0.1到1mmp左右,而在桃中限量為15,中國蔬菜限量為0.1左右,而水果則為3。
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