1.彎曲菌屬的主要特點及分類
彎曲菌屬(Campylobacter) 是一類呈逗點狀或S形的革蘭陰性杆菌,廣泛分布於動物界,其中有些可引起動物和人類的腹瀉、胃腸炎和腸道外感染。
目前彎曲菌屬共有18個菌種和亞種,引起人類疾病的主要是空腸彎曲菌空腸亞種,其次是胎兒彎曲菌和大腸彎曲菌等。
2.細菌特性
(1)形態染色 本屬細菌為革蘭陰性無芽孢的彎曲短杆菌,不易染色,菌體彎曲呈S狀或海鷗展翅狀等,一端或兩端各有一根鞭毛,運動活潑,暗視野顯微鏡下呈“投標樣”運動。
(2)培養特性 微需氧菌,最適生長環境是含氧氣5%、二氧化碳10%、氮氣85%;孵育溫度通常取決於所需要分離的菌株,在不同的溫度下培養基的選擇性也不同,通常絕大多數實驗室用42℃作為初始分離溫度,這一溫度對空腸彎曲菌、大腸彎曲菌的生長有利,相反其他菌株在37℃生長良好。
營養要求高,在普通培養基上不生長,分離彎曲菌常用的選擇性培養基大多含有抗生素(主要為頭孢呱酮),以抑製腸道正常菌群。常用的有含血的Skirrow培養基、頭孢呱酮-萬古黴素-兩性黴素瓊脂培養基(CVA)和不含血的碳-頭孢呱酮-去氧膽酸鹽(CCDA)、碳基選擇性培養基(CSM)和半固體動力培養基等。
(3)生化反應 氧化酶和觸酶陽性,可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,不分解和不發酵各種糖類,不分解尿素,具體生化反應見表13-1。
(4)抵抗力 本屬細菌的抵抗力弱,對一般消毒劑敏感,但耐寒,在4℃冰箱或水中可存活達4周。


注:+,>90%陽性;-,<10%陽性;V,可變;ND,未定;W,反應較弱;S,敏感;R,耐藥
3.臨床意義
彎曲菌的傳播途徑主要為食物和水,傳播方式多為經口傳播,食用未煮熟的雞、飲用未經處理的水和未經消毒的牛奶均可引起彎曲菌腸炎的發生。本菌具有黏附定居和入侵上皮細胞的能力,通過產生的腸毒素、細胞毒素和內毒素等多種毒力因子致病,病變部位通常在空腸、回腸,也可蔓延至結腸。
空腸彎曲菌空腸亞種是彎曲菌中最重要也是最常見的的人體致病菌(占彎曲菌腹瀉的80%~90%),腹瀉是空腸彎曲菌感染最常見的臨床表現。除腸炎外,近年來也出現了空腸彎曲菌繼發關節炎敗血症、腦膜炎和格林巴利綜合征。GBS病人分離到的空腸彎曲菌大都具有特殊的血清型O:19,可與人體的神經組織發生交叉免疫反應而致病。
胎兒彎曲菌主要引起腸道外感染,其中胎兒亞種和貓、綿羊的感染性流產關係密切,較少引起人類感染,感染人體常引起全身症狀。
4.微生物學檢驗
(1)檢驗程序
(2)標本采集 可采集糞便、肛拭子及剩餘食物,標本采集後應立即送檢,或將標本接種於卡-布運送培養基中送檢;對於高燒和患腦膜炎的病人,可於用藥前抽取靜脈血或腦脊液,注入布氏肉湯中送檢。
(3)檢驗方法
1)顯微鏡檢查 ①懸滴法動力檢查:顯微鏡下觀察有無螺旋狀或投標樣運動,腦脊液標本經離心沉澱後再製成懸滴標本檢查;②染色標本檢查:取新鮮糞便或腦脊液離心沉澱物塗片、革蘭染色,查找革蘭陰性、彎曲呈S狀或螺旋狀杆菌,鞭毛染色見一端或兩端單根鞭毛;
2)分離培養 可將標本直接接種於選擇性培養基上,也可將標本過濾後培養,彎曲菌形成的菌落為灰色、扁平、表麵濕潤、圓形凸起、邊(bian)緣(yuan)不(bu)規(gui)則(ze),常(chang)沿(yan)穿(chuan)刺(ci)線(xian)蔓(man)延(yan)生(sheng)長(chang)的(de)菌(jun)落(luo),在(zai)血(xue)平(ping)板(ban)上(shang)不(bu)溶(rong)血(xue)。本(ben)屬(shu)細(xi)菌(jun)在(zai)布(bu)氏(shi)肉(rou)湯(tang)中(zhong)呈(cheng)均(jun)勻(yun)混(hun)濁(zhuo)生(sheng)長(chang)。培(pei)養(yang)時(shi)需(xu)注(zhu)意(yi)氣(qi)體(ti)環(huan)境(jing)和(he)適(shi)合(he)的(de)溫(wen)度(du),空(kong)腸(chang)彎(wan)曲(qu)菌(jun)最(zui)適(shi)的(de)溫(wen)度(du)為(wei)42℃~43℃,胎兒彎曲菌在42℃不生長。
3)鑒定 彎曲菌屬的鑒定比較複雜,必須綜合多種試驗才能確定。通常在彎曲菌選擇培養基上氧化酶陽性、革蘭染色陰性、彎曲呈S形或螺旋形的細菌初步鑒定為彎曲菌,進一步的鑒定試驗有:①馬尿酸鹽水解試驗:本試驗是鑒別空腸彎曲菌空腸亞種和多氏亞種的重要試驗,在彎曲菌選擇性培養基上經42℃孵育,氧化酶陽性、有特征性的彎曲菌形態、輔以馬尿酸鹽試驗陽性即可報告為空腸彎曲菌空腸亞種;②醋酸吲哚水解試驗:本試驗空腸彎曲菌為陽性而胎兒彎曲菌為陰性;③萘啶酸、頭孢噻吩耐藥試驗:空腸彎曲菌和大腸彎曲菌對萘啶酸敏感,對頭孢噻吩耐藥;胎tai兒er彎wan曲qu菌jun對dui萘nai啶ding酸suan耐nai藥yao而er對dui頭tou孢bao噻sai吩fen敏min感gan。近jin來lai出chu現xian了le對dui萘nai啶ding酸suan耐nai藥yao的de空kong腸chang彎wan曲qu菌jun和he大da腸chang彎wan曲qu菌jun,應ying結jie合he馬ma尿niao酸suan鹽yan水shui解jie試shi驗yan進jin行xing鑒jian定ding。
彎曲菌的其餘鑒定試驗有:不同溫度的生長試驗(25℃、37℃、42℃)、觸酶試驗、硝酸鹽還原試驗、產H2S試驗等(見表13-1)。
(4)耐藥性 由(you)於(yu)彎(wan)曲(qu)菌(jun)感(gan)染(ran)大(da)多(duo)呈(cheng)輕(qing)症(zheng)和(he)自(zi)限(xian)性(xing),一(yi)般(ban)不(bu)需(xu)特(te)異(yi)性(xing)治(zhi)療(liao)。體(ti)外(wai)試(shi)驗(yan)顯(xian)示(shi),絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)彎(wan)曲(qu)菌(jun)對(dui)頭(tou)孢(bao)菌(jun)素(su)和(he)青(qing)黴(mei)素(su)耐(nai)藥(yao),環(huan)丙(bing)沙(sha)星(xing)治(zhi)療(liao)彎(wan)曲(qu)菌(jun)感(gan)染(ran)非(fei)常(chang)有(you)效(xiao),但(dan)近(jin)年(nian)來(lai)也(ye)出(chu)現(xian)了(le)不(bu)少(shao)耐(nai)藥(yao)菌(jun)株(zhu)。空(kong)腸(chang)彎(wan)曲(qu)菌(jun)通(tong)常(chang)對(dui)紅(hong)黴(mei)素(su)敏(min)感(gan),其(qi)耐(nai)藥(yao)率(lv)小(xiao)於(yu)5%;而80%以上的大腸彎曲菌對紅黴素耐藥。胎兒彎曲菌引起的全身感染可用紅黴素、氨苄西林、氨基糖苷類和氯黴素治療。
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