大腸菌群(大腸杆菌)檢測實驗培養基(LST)滅mie菌jun時shi,偶ou爾er會hui有you小xiao氣qi泡pao留liu在zai小xiao導dao管guan內nei,導dao致zhi培pei養yang基ji不bu能neng使shi用yong。重zhong複fu滅mie菌jun不bu僅jin費fei時shi費fei電dian,還hai會hui破po壞huai培pei養yang基ji的de成cheng分fen。為wei了le避bi免mian問wen題ti的de發fa生sheng,根gen據ju實shi驗yan經jing驗yan和he嚴yan密mi思si考kao做zuo出chu幾ji種zhong原yuan因yin分fen析xi,並bing給gei予yu解jie決jue的de辦ban法fa。
*原因一:過早打開滅菌鍋
當滅菌鍋壓力表示數為0而(er)溫(wen)度(du)表(biao)示(shi)數(shu)還(hai)高(gao)於(yu)室(shi)溫(wen)時(shi),不(bu)要(yao)打(da)開(kai)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)。因(yin)為(wei)打(da)開(kai)鍋(guo)蓋(gai)瞬(shun)間(jian),鍋(guo)內(nei)大(da)量(liang)熱(re)量(liang)散(san)出(chu),溫(wen)度(du)突(tu)然(ran)降(jiang)低(di),試(shi)管(guan)內(nei)溫(wen)度(du)也(ye)隨(sui)著(zhe)降(jiang)低(di),導(dao)致(zhi)管(guan)內(nei)氣(qi)減(jian)小(xiao),沸(fei)點(dian)降(jiang)低(di),部(bu)分(fen)水(shui)會(hui)汽(qi)化(hua)留(liu)在(zai)小(xiao)導(dao)管(guan)內(nei)。
解決辦法:等滅菌鍋內氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。
*原因二:試管塞塞得太緊(使用矽膠塞的時候)
試管塞塞得太緊在滅菌時會導致試管內與滅菌鍋內壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時,鍋內壓力會大於管內壓力;滅菌鍋降溫降壓時,鍋內壓力小於管內壓力。鍋內壓力會大於管內壓力時,試管內壓力不夠,不能將小導管內氣體排盡,就留有氣泡;鍋內壓力小於管內壓力時,可能會使試管塞和培養基崩出,培養基報廢。
解決辦法:改用透氣性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。
*原因三:小導管口太小
womenkeyibayigenmaoxiguanyiduanfengkou,lingyiduanchajinshuili,maoxiguanlizenmedoubuhuijinshui。tongyangbayigeshaobeidaokoujinshuilijiuhenrongyijinshuile。xiaodaoguanzaijiayahouyifangmianshuiyaojinqu,lingwailimiandekongqiyaochulai,ruguokoutaixiaodehua,kongqiburongyichuqu,shuiyeburongyijinlai,jiuhuidaozhiqipaoliuzailimianle。
解決辦法:改用內空較大的導管,盡量使用V型管,不要使用錐型管。
原因四:培養基質量引起
youpeiyangjizhiliangyinqideqitibunengpaijinhuopeiyangjihanyougaowengaoyafenjiechanqidechengfen。miejunshiyongshuizuopeiyangjizudeduizhaoshiyan,ruopeiyangjizuyouqipao,erduizhaozumeiyouqipao,kequedingshiyouciyuanyinyinqi。
解決辦法:改用其它培養基。
原因五:滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能排盡
滅mie菌jun鍋guo最zui大da壓ya力li不bu夠gou,不bu能neng使shi管guan內nei液ye體ti強qiang行xing把ba氣qi體ti擠ji出chu,最zui後hou還hai留liu有you小xiao氣qi泡pao,還hai會hui使shi溫wen度du上shang升sheng緩huan慢man,或huo達da不bu到dao滅mie菌jun溫wen度du。此ci原yuan因yin的de可ke能neng性xing較jiao小xiao,我wo們men可ke以yi在zai排pai除chu上shang述shu四si點dian原yuan因yin的de情qing況kuang下xia,用yong不bu加jia試shi管guan塞sai、大口導管做試驗,若還仍不能達到效果,就要檢查滅菌鍋了。
解決辦法:修理滅菌鍋。
注意事項:① * 為主要原因。②不要將試管倒置,以免試管口和試管塞受培養基汙染。
若使用非全自動高溫高壓滅菌鍋(此類鍋一般需要在100℃手動關閉放氣閥),則不要在鍋剛達到100℃時就關閉放氣閥,可以讓高壓鍋在100℃時多排一會兒熱氣,這樣有助於小倒管中氣體排出。
此(ci)外(wai),盡(jin)量(liang)不(bu)要(yao)采(cai)用(yong)將(jiang)滅(mie)菌(jun)後(hou)的(de)試(shi)管(guan)顛(dian)倒(dao)或(huo)大(da)角(jiao)度(du)傾(qing)斜(xie)的(de)方(fang)式(shi),使(shi)小(xiao)倒(dao)管(guan)內(nei)氣(qi)體(ti)排(pai)出(chu)。此(ci)種(zhong)方(fang)法(fa)可(ke)能(neng)會(hui)導(dao)致(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)通(tong)過(guo)試(shi)管(guan)口(kou)或(huo)試(shi)管(guan)塞(sai)受(shou)到(dao)汙(wu)染(ran),或(huo)者(zhe)導(dao)致(zhi)試(shi)管(guan)內(nei)液(ye)體(ti)流(liu)出(chu)。
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