最近網上一條「如何定量吸取液體?」的帖子引起熱烈討論。原因是博主 po 出 100 年前的移液方式――用嘴巴吸,在眾多手動自動、單孔連排移液槍圖片的中間,顯得尤為突出和滑稽。
不過更讓人震驚的是評論區的精彩發言,直到現在仍然有老師同學在用這個「傳統」的操作。
其實「嘴巴移液」已延續百年,因為這樣操作可以在一定程度上做到「又準又穩」。但用嘴巴移液這樣的操作,肯定是存在風險的,比如:1893 年一位內科醫生在操作時因為意外而吸入了傷寒杆菌的培養液,不幸中招。
現在,大多數實驗室都配備了移液槍,更加安全更加精準。但別以為這樣就結束了,因為移液不準,會引發太大的災難――實驗數據重現「危機」,實驗數據無法複製,代表了前期努力全部白費!比如:PCR 實驗做了三次,每次結果都不一樣;WB,樣本參數都相同,每次趨勢卻各不同;實驗數據重現不出來,輸在起跑線上……
因yin此ci,各ge大da移yi液ye器qi品pin牌pai均jun建jian議yi每mei年nian至zhi少shao進jin行xing一yi次ci預yu防fang性xing維wei護hu且qie在zai保bao養yang間jian隔ge期qi間jian進jin行xing常chang規gui性xing能neng驗yan證zheng,以yi保bao持chi吸xi液ye和he分fen液ye的de準zhun確que度du。那na麼me,日ri常chang實shi驗yan中zhong如ru何he開kai展zhan檢jian查zha、清潔消毒、正確移液等才能提升實驗數據穩定性,讓實驗一遍過呢?
秘籍內容一睹為快:
1. 選擇優質移液槍
若要實現可重現移液,請選擇在整個移液循環(吸液和分液)中都準確無誤的優質移液槍。
2. 選擇正確吸頭
移液槍吸頭是樣品和移液槍之間的唯一接觸點,因此所選的移液槍吸頭類型在液體處理過程中發揮著重要作用。
● 未滅菌吸頭適用於無需擔心汙染或不會影響結果的實驗。
● 無菌吸頭適用於細胞培養和分子檢測等敏感實驗,可防止汙染物影響結果,進而影響實驗的可重現性。
● 無菌濾芯吸頭可減少氣霧形成、保護移液槍套柄在使用過程中免受汙染,從而多加一層保護。
3. 改進移液技術
選擇正確維護且經驗證的優質移液槍,同時搭配原廠吸頭,還可通過改善操作人員技術來提高數據重現性。
以移液槍標稱值上限進行操作
大多數移液槍的正常量程為標稱容量的 10% 至 100%。
適當的吸頭入液
微量移液槍的吸頭入液深度應當為 1~2 mm,大容量移液槍(200~2 000 μL) 的吸頭入液深度高達 6~10 mm。
提高吸液性能
在使用過程中保持移液槍角度垂直、移液節奏一致、活塞操作迅速流暢。
提高分液性能
較(jiao)為(wei)常(chang)用(yong)的(de)一(yi)種(zhong)分(fen)液(ye)技(ji)術(shu)是(shi)將(jiang)吸(xi)頭(tou)接(jie)觸(chu)容(rong)器(qi)內(nei)壁(bi)的(de)側(ce)麵(mian)。如(ru)果(guo)溶(rong)液(ye)溫(wen)度(du)為(wei)室(shi)溫(wen),則(ze)潤(run)洗(xi)吸(xi)頭(tou)兩(liang)到(dao)三(san)次(ci)可(ke)在(zai)吸(xi)頭(tou)內(nei)壁(bi)形(xing)成(cheng)一(yi)層(ceng)液(ye)膜(mo)。如(ru)果(guo)溶(rong)液(ye)溫(wen)度(du)低(di)於(yu)4℃ 和高於 37℃,則應避免潤洗吸頭。
創造適合的環境條件
移液環境溫度應保持穩定。移液的理想溫度為 21.5℃±1℃,與校準的理想溫度相同。
文章(文字)來源:丁香學術
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